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產(chǎn)品描述

外泌體濃縮液是一款適用于大體積外泌體樣本的高效濃縮試劑,，能快速處理大體積樣本。濃縮后的樣本可用于后續(xù)的外泌體分離純化,、RNA 提取,、蛋白提取等實(shí)驗(yàn)。

本產(chǎn)品主要用于尿液和細(xì)胞培養(yǎng)上清中的外泌體濃縮,，但濃縮后的外泌體不適合直接進(jìn)行 NTA 粒徑分析,、Western Blot、qPCR,、NGS 測(cè)序,、外泌體標(biāo)記或蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析等。

訂購(gòu)信息

運(yùn)輸與保存

常溫運(yùn)輸,。4℃保存,，有效期12個(gè)月。

使用方法

自備儀器,、試劑與耗材：高速冷凍離心機(jī),、50mL離心管、無(wú)菌PBS,。

1.     樣品預(yù)處理

(1)  去除細(xì)胞：對(duì)含細(xì)胞樣品,，4℃，300g,，離心 5min,，將上清轉(zhuǎn)移至新離心管；無(wú)細(xì)胞樣品可跳過(guò)此步驟,。

(2)  去除細(xì)胞及細(xì)胞碎片：4℃,，2,000g，離心10min,，將上清轉(zhuǎn)移至新離心管,。

(3)  去除大體積顆粒：將步驟(2)獲得的上清液在4℃，14,000g,，離心 30min,，取上清轉(zhuǎn)移至新離心管?；蜻x擇替代方法：將步驟(2)的上清液通過(guò) 0.2μm 微孔濾膜過(guò)濾,，收集濾液。

2.     大體積外泌體樣本濃縮

(1)  將預(yù)處理后的樣品24mL加入50mL離心管,，加入6mL外泌體濃縮液,，上下顛倒充分混勻,。注：樣本體積與外泌體濃縮液的比例為4:1，可按此比例調(diào)整樣本體積,。為保證效果,，推薦濃縮樣本體積不少于24mL。

(2)  室溫孵育60 min（快速流程）,；如時(shí)間允許,，推薦在 4℃ 過(guò)夜孵育（高回收流程）。

(3)  在4℃,、12,000g 離心 30min,，棄去上清。小心吸棄或倒出上清后,，用200μL移液器盡量吸凈殘余上清,。

3.     外泌體樣本重懸

(1)  向沉淀中加入適量無(wú)菌 PBS，用移液器輕柔上下吹打,，充分混勻,。注：無(wú)菌PBS的加入體積可靈活調(diào)整，但濃縮倍數(shù)不建議超過(guò) 50倍,，推薦濃縮24-30倍。若將本試劑盒用于外泌體分離,，按細(xì)胞培養(yǎng)上清/尿液樣本10mL,，加入100μL無(wú)菌PBS進(jìn)行重懸。

(2)  待外泌體樣本溶解后,，可用于外泌體分離純化,、RNA 提取、蛋白提取等后續(xù)實(shí)驗(yàn),。注：如不立即進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),，可將溶解后的樣本置于-80℃保存（若24h內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，可4℃保存）,。如進(jìn)行外泌體分離純化,，可選擇沉淀法外泌體分離產(chǎn)品 (貨號(hào)：AC15L412) ，SEC法外泌體分離產(chǎn)品 (貨號(hào)：AC25L434) ,，或磁珠法外泌體分離產(chǎn)品 (貨號(hào)：AC25L422) 或 (貨號(hào)：AC25L423),。

注意事項(xiàng)

1． 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷,、治療等領(lǐng)域,。

2． 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

3． 使用過(guò)程中,，盡量在無(wú)菌環(huán)境開(kāi)啟瓶蓋，減少對(duì)試劑的污染。

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本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,，不得用于臨床診斷,、治療等領(lǐng)域。