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貨物所在地:上海上海市
更新時(shí)間:2024-09-05 14:39:31
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產(chǎn)品描述
脂質(zhì)過氧化 傳感器 (Lipid Peroxidation Sensor)是一種新型的對(duì)Lipid ROS 高選擇性、高靈敏的脂質(zhì)過氧化 傳感器,,與其他ROS捕獲探針不同之處在于,,C11-BODIPY 581/591 具有好的親脂性可以快速入膜,隨后可以選擇性的對(duì)細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞膜中的脂質(zhì)過氧化(Lipid ROS)進(jìn)行捕獲,,并在氧化后仍保持親脂性,,不會(huì)離開脂質(zhì)膜,該過程同時(shí)伴隨熒光信號(hào)變化,。多用于熒光顯微鏡,、流式細(xì)胞分析等對(duì)Lipid ROS 的可視化監(jiān)測(cè)。
脂質(zhì)過氧化 傳感器結(jié)構(gòu)中多不飽和丁間二烯基在Lipid ROS 催化氧化后,,其熒光發(fā)射峰從590 nm偏移至510 nm,。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
脂質(zhì)過氧化 傳感器Lipid Peroxidation Sensor | AC12L733 | 0.5mg |
脂質(zhì)過氧化 傳感器Lipid Peroxidation Sensor | AC12L734 | 1mg |
運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。-20℃保存,有效期36個(gè)月,。
使用方法
一,、樣品溶解
商品開封后,離心機(jī)輕甩,;隨后加入適量DMSO 進(jìn)行溶解,,溶解度至少可達(dá)25mg/mL。溶解后建議分裝 -20℃ 避光保存,,盡量避免反復(fù)凍融,,防止吸潮?!咀ⅰ浚簶悠份p甩目的是為了避免痕量的探針吸附管壁損失樣本,。
二、樣品使用
1. 流式細(xì)胞分析:
懸浮細(xì)胞:800 g 離心5 min 收集細(xì)胞沉淀,;隨后PBS 洗滌細(xì)胞兩遍,。
貼壁細(xì)胞:棄培養(yǎng)液,用常溫PBS 或培養(yǎng)液輕洗細(xì)胞2 次,,隨后胰*消化,,800g 離心5 min 收集細(xì)胞沉淀,,隨后PBS 洗滌細(xì)胞兩遍,,每個(gè)樣本收集1~5 ×105 個(gè)細(xì)胞?!咀ⅰ浚翰僮鬟^程中輕柔吹打細(xì)胞,,消化時(shí)間不宜過長,劇烈吹打或胰*消化過度會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。
脂質(zhì)過氧化 傳感器用于脂質(zhì)過氧化檢測(cè)的推薦濃度為終濃度5μM,;配制方法:用新鮮空白培養(yǎng)液配制終濃度為5μM 的脂質(zhì)過氧化傳感器染色液待用,DMSO 含量≤5‰,?!咀ⅰ浚涸摬讲僮鹘ㄗh在消化細(xì)胞前準(zhǔn)備好,以免細(xì)胞消化后久置影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。
將事先配置好的脂質(zhì)過氧化染色液加入收集的細(xì)胞沉淀中,,推薦體積為500μL,隨后置于37℃孵箱,,染色30min,,期間5-10min 間隔輕彈細(xì)胞使其懸浮保證染色更充分。
染色結(jié)束后,,800 g 離心5 min,,棄上清,隨后用PBS 清洗細(xì)胞2 次,加入200μLPBS 重懸細(xì)胞用于流式分析,。
2. 原位成像:
接種適當(dāng)密度的細(xì)胞于20mm 規(guī)格的蓋玻片上(也可用共聚焦小皿替代),,給予實(shí)驗(yàn)藥物處理適當(dāng)時(shí)
間后,吸去培養(yǎng)液,,用PBS 洗滌細(xì)胞一遍,;加入500 μL 配制好的脂質(zhì)過氧化染色液,于37℃染色30min,;配制方法參考流式分析中的染色液配制,。
棄培養(yǎng)液,PBS 洗滌細(xì)胞兩遍后于熒光顯微鏡或激光共聚焦下進(jìn)行成像檢測(cè),。細(xì)胞在染色后應(yīng)在1 h之內(nèi)完成檢測(cè),。
3. 檢測(cè)條件:
該分子探針在還原狀態(tài)下最佳激發(fā)波長為581 nm, 發(fā)射為591nm,;被Lipid ROS 氧化后最佳激發(fā)波長
為500 nm,,發(fā)射在510nm,。因此,在流式分析中檢測(cè)通道為FL1-A,;激光共聚焦檢測(cè):氧化態(tài)激發(fā)波長可
選488nm(FITC)通道;還原態(tài)激發(fā)波長可選561 nm(TRITC)通道,。
注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域,。
使用前小心離心數(shù)秒取用,需佩戴手套操作,,注意避免與皮膚,、眼睛和黏膜接觸,。
本試劑盒可用檢測(cè)活細(xì)胞中Lipid ROS 水平,用于評(píng)價(jià)細(xì)胞鐵死亡狀態(tài),。
流式分析效果圖,、原位成像圖詳見官,。
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