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AN51L758-TRIzol
  • AN51L758-TRIzol

貨物所在地:上海上海市

更新時間:2024-11-30 21:00:07

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TRIzol的主要成分是異硫 qíng 酸胍,,它可以破壞細胞,,使細胞RNA釋放出來,同時保護RNA的完整性,,因此,,常用于動植物細胞RNA的提取。

產品描述
     TRIzol主要成分是異硫 
qíng ,,它可以破壞細胞,,使細胞RNA釋放出來同時保護RNA的完整性,,因此,,常用于動植物細胞RNA的提取。
訂購信息

產品名稱貨號規(guī)格價格
TRIzolAN51L758100 mL328


運輸與保存
常溫運輸。4℃保存,,有效期12個月,。
使用方法
1.準備樣品 
(1)組織樣品
液氮研磨組織法,組織塊直接放入研缽中,,加入少量液氮,,迅速研磨,待組織變軟,,再加少量液氮,,再研磨,如此三次,,按組織樣品質量與
 T R I z o l 體積按照50~100mg/mL加入,,勻漿。
【注】:組織體積不能超過 T R I z o l 體積的10%,, 否則勻漿效果不好,,用電動勻漿器勻漿約需1~2 min 。
(2)細胞
對于培養(yǎng)貼壁細胞:不須消化,,可直接用
 T R I z o l 進行消化裂解,, T R I z o l 體積按10cm²/mL比例加入。
對于懸浮細胞可直接收集,,消化裂解,,每1 mL 
 T R I z o l 可裂解 5×106動物植物或酵母細胞,,或1×107細菌細胞,。

  1. 細胞或組織加 T R I z o l 后,室溫放置5 min,使其充分裂解,。

【注】:此時可放入﹣70℃長期保持,。

  1. 12,000g離心5 min,棄沉淀。
  2. 按200 μL氯仿/ml  T R I z o l 加入仿,,振蕩混勻后室放置15 min,。

【注】:禁用漩渦振蕩器,以免基因組DNA斷裂,。
5. 4,12,000g離心15 min ,。

  1. 吸取上層水相,至另一離心管中,。

【注】:千萬不要吸取中間界面:若同時提取DNA和蛋白質,,則保留下層酚相存于4℃冰箱,若只提RNA,則棄下層酚相,。
7. 0.5ml異丙醇/mI
 T R I z o l 加入異丙醇混勻,,室溫放置5~10 min 
8. 4 12,000g離心10 min, 棄上清,RNA沉于管底,。

  1. 按1 mL 75%乙醇/ml  T R I z o l 加入75%乙醇,,溫和振蕩離心管,懸浮沉淀,。

10. 4 8,000g 離心5 min, 盡量棄上清液,。

  1. 室溫晾干或真空干燥5~10 min。

【注】:RNA樣品不要過于干燥,,否則很難溶解,。
12. 可用50 μL H2OTE buffer或0.5%SDS溶解RNA樣品,,55~60 ,5~10 min,。
【注】:H2O.TE或0.5%SDS均須用DEPC處理并高壓。
注意事項
1.操作人員應經過專門培訓,,嚴格遵守操作規(guī)程,。
2.操作處置應在具備局部通風或全面通風換氣設施的場所進行。
3.避免眼和皮膚的接觸,,避免吸入蒸汽,。
4.遠離火種、熱源,,工作場所嚴禁吸煙,。
5.整個提RNA過程需要無RNase的實驗用具。
6.本產品僅限于科學實驗研究使用,,不得用于臨床診斷,、治療等領域。
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