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Cell Cycle and Apoptosis Kit Plus（細胞周期檢測試劑盒Plus）

產(chǎn)品描述
　　Cell Cycle and Apoptosis Kit Plus（細胞周期檢測試劑盒Plus）采用RedNucleus I染色法檢測細胞周期，RedNucleus I是一種遠紅外核酸染料,，具有細胞膜透性,，可快速進入活細胞，特異結(jié)合DNA,，對活細胞進行周期檢測,，且無需RNase的消化。與傳統(tǒng)的碘化丙啶染色（PI staining）方法相比,，細胞無需破膜或固定,，操作更加簡便,。
　　RedNucleus I是一種雙鏈DNA的熒光染料，與雙鏈DNA結(jié)合后的熒光強度和雙鏈DNA的含量成正比,?？赏ㄟ^流式細胞儀測定細胞內(nèi)DNA含量，然后根據(jù)DNA含量的分布情況,，進行細胞周期分析,。RedNucleus I 染色后，假設(shè)G0/G1期細胞的熒光強度為1,，那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細胞的熒光強度的理論值為2,，正在進行DNA復制的S期細胞的熒光強度為1-2之間。此外,，RedNucleus I與Horizon BV / BUV,、FITC和R-PE等染料兼容，可在樣品染色后進行周期檢測,。
　　本試劑盒通常應用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細胞的細胞周期檢測,，如果用于組織的細胞周期檢測，則必須先把組織消化成單細胞狀態(tài),。
訂購信息

產(chǎn)品組分

保存方法
　　4℃保存,，有效期見外包裝。長期儲存請于-20℃保存,。RedNucleus I 染色液需避光保存,。
操作步驟
1.細胞樣品的準備：
（1）（此步驟是針對貼壁細胞，若為懸浮細胞,，可直接進行第2步）用胰酶消化細胞,，加入細胞培養(yǎng)液，輕輕吹散細胞后,，收集到離心管內(nèi),。
（2）1000 g左右離心3-5 min，沉淀細胞,。小心吸除上清,，加入約1 mL冰浴預冷的1×的染色緩沖液（將10×的染色緩沖液用diH2O 按1：10 稀釋），重懸細胞,。重復一次,。
（3）1000 g左右離心3-5 min,，沉淀細胞,。棄上清后，加入1 mL 培養(yǎng)基重懸細胞（對于固定細胞,，也可用1×PBS 重懸）,。輕輕彈擊離心管底以適當分散細胞,，避免細胞成團。
2.染色：
（1）每管細胞樣品中加入4 μL 的RedNucleus I 染色液,，緩慢并充分混勻,，室溫避光孵育20 min（或在37 ℃避光孵育5-10 min）。
3.流式檢測和分析：
（1）用流式細胞儀在638 nm 處激發(fā),，推薦在RL3或FL4 通道檢測,，也可使用RL1、RL2通道檢測,。采用適當分析軟件進行細胞DNA含量分析和光散射分析,。
注意事項
1.該產(chǎn)品*于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷,、治療等領(lǐng)域,。
2.本產(chǎn)品適用于活細胞和固定細胞周期檢測。如需固定,，推薦使用冰浴預冷75-80% 的乙醇過夜固定細胞,。
3.熒光染料均存在淬滅問題，保存和使用過程中請盡量注意避光,，以減緩熒光淬滅,。
4.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。