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產(chǎn)品描述

外泌體濃縮液是一款適用于大體積外泌體樣本的高效濃縮試劑，能快速處理大體積樣本,。濃縮后的樣本可用于后續(xù)的外泌體分離純化,、RNA 提取、蛋白提取等實驗,。

本產(chǎn)品主要用于尿液和細胞培養(yǎng)上清中的外泌體濃縮,，但濃縮后的外泌體不適合直接進行 NTA 粒徑分析、Western Blot,、qPCR、NGS 測序,、外泌體標記或蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析等,。

訂購信息

運輸與保存

常溫運輸。4℃保存,，有效期12個月,。

使用方法

自備儀器、試劑與耗材：高速冷凍離心機,、50mL離心管,、無菌PBS。

1.     樣品預處理

(1)  去除細胞：對含細胞樣品,，4℃,，300g，離心 5min,，將上清轉(zhuǎn)移至新離心管,；無細胞樣品可跳過此步驟。

(2)  去除細胞及細胞碎片：4℃,，2,000g,，離心10min,，將上清轉(zhuǎn)移至新離心管。

(3)  去除大體積顆粒：將步驟(2)獲得的上清液在4℃,，14,000g,，離心 30min，取上清轉(zhuǎn)移至新離心管,?；蜻x擇替代方法：將步驟(2)的上清液通過 0.2μm 微孔濾膜過濾，收集濾液,。

2.     大體積外泌體樣本濃縮

(1)  將預處理后的樣品24mL加入50mL離心管,，加入6mL外泌體濃縮液，上下顛倒充分混勻,。注：樣本體積與外泌體濃縮液的比例為4:1,，可按此比例調(diào)整樣本體積。為保證效果,，推薦濃縮樣本體積不少于24mL,。

(2)  室溫孵育60 min（快速流程）；如時間允許,，推薦在 4℃ 過夜孵育（高回收流程）,。

(3)  在4℃、12,000g 離心 30min,，棄去上清,。小心吸棄或倒出上清后，用200μL移液器盡量吸凈殘余上清,。

3.     外泌體樣本重懸

(1)  向沉淀中加入適量無菌 PBS,，用移液器輕柔上下吹打，充分混勻,。注：無菌PBS的加入體積可靈活調(diào)整,，但濃縮倍數(shù)不建議超過 50倍，推薦濃縮24-30倍,。若將本試劑盒用于外泌體分離,，按細胞培養(yǎng)上清/尿液樣本10mL，加入100μL無菌PBS進行重懸,。

(2)  待外泌體樣本溶解后,，可用于外泌體分離純化、RNA 提取,、蛋白提取等后續(xù)實驗,。注：如不立即進行后續(xù)實驗，可將溶解后的樣本置于-80℃保存（若24h內(nèi)進行實驗,，可4℃保存）,。如進行外泌體分離純化,，可選擇沉淀法外泌體分離產(chǎn)品 (貨號：AC15L412) ，SEC法外泌體分離產(chǎn)品 (貨號：AC25L434) ,，或磁珠法外泌體分離產(chǎn)品 (貨號：AC25L422) 或 (貨號：AC25L423),。

注意事項

1． 本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷,、治療等領(lǐng)域,。

2． 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。

3． 使用過程中,，盡量在無菌環(huán)境開啟瓶蓋，減少對試劑的污染,。

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本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用,，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域,。