目錄:和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)>>細(xì)胞凋亡>> AC12L011/AC12L012/AC12L01Hoechst 33258 *超級純*
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5 mL(20mM) |
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貨號 | AC12L011/AC12L012/AC12L013 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | Hoechst 33258常用于細(xì)胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀 |
Hoechst33258 *超級純*
產(chǎn)品描述
Hoechst 33258是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,,對細(xì)胞的毒性較低,,在嵌入雙鏈DNA后釋放強烈的藍(lán)色熒光。Hoechst 33258為特異性DNA染料,,與A-T鍵結(jié)合,,這種染料對死細(xì)胞或經(jīng)70%冷乙醇固定的細(xì)胞可立即染色,。而活細(xì)胞的著色是漸進性的,在10 min內(nèi)可達(dá)飽和,。在熒光顯微鏡下,,活細(xì)胞核呈彌散均勻熒光,出現(xiàn)細(xì)胞凋亡時,,細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見濃染致密的顆粒塊狀熒光,。Hoechst 33258常用于細(xì)胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測,,也可以用于普通的細(xì)胞核和線粒體的顯像觀察,。
Hoechst經(jīng)常用來代替其它核酸染料如DAPI,這兩種染料關(guān)鍵的不同點在于,,與DAPI相比,Hoechst 33258具有更強的親脂性,,因此能更好的透過完整的細(xì)胞膜,。用于細(xì)胞核染色時,,推薦的Hoechst 33258工作濃度為0.5~10 μg/mL,。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 保存 | 價格(元) |
Hoechst 33258 *超級純* | AC12L011 | 5 mL(20mM) | -20℃ | 1580 |
Hoechst 33258 *超級純* | AC12L012 | 100mg | -20℃ | 1580 |
Hoechst33258 *超級純* | AC12L013 | 1g | -20℃ | 5980 |
保存方法
冰袋(wet ice)運輸,-20℃干燥避光保存,,保質(zhì)期12個月,。
技術(shù)參數(shù)
光學(xué)性質(zhì):Ex(nm):352 Em(nm):461
化學(xué)參數(shù):分子量:533.88 溶劑:Water CAS:23491-45-4
使用方法
1. 緩沖液制備,。用PBS或合適的緩沖液制備10~50μM Hoechst 33258染色液。
2. 固定的細(xì)胞或組織染色,。
對于固定的細(xì)胞或組織樣品,,固定后,適當(dāng)洗滌去除固定劑,。依次按步驟進行免疫熒光染色,,和Hoechst33258染色。如果不進行免疫熒光染色,,則直接按步驟進行Hoechst33258染色,。
(1)對于貼壁細(xì)胞或組織切片:加入適量Hoechst 33258染色液,覆蓋住樣品即可,。對于懸浮細(xì)胞:至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液,,混勻。室溫放置3~5 min,。
(2)吸除Hoechst 33258染色液,,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2~3次,每次3~5 min,。
(3)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察,。激發(fā)波長350 nm,發(fā)射波長460 nm,。
3. 活細(xì)胞或組織染色
(1)細(xì)胞培養(yǎng)物中加入適量Hoechst 33258染色液,,約1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積,必須充分覆蓋住待染色的樣品,。通常對于六孔板一個孔需加入1 mL染色液,,對于96孔板一個孔需加入100 μL染色液。
(2)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞10~20分鐘,。
(3)用PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次,。
(4)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長350 nm,,發(fā)射波長460 nm,。
注意事項
1. Hoechst 33258溶于水,溶解度可達(dá)20mM(約10mg/ml),。您也可直接購買20mM的液體規(guī)格產(chǎn)品(貨號:AC12L011),。
2. Hoechst 33258對人體有一定刺激性,請注意適當(dāng)防護,。
3. 熒光染料都存在淬滅的問題,,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測。
4. 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液,。
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