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慢病毒載體可感染分裂細(xì)胞及非分裂細(xì)胞,。其轉(zhuǎn)移基因片段容量較大，目的基因表達(dá)時(shí)間較長,，不易引發(fā)宿主免疫反應(yīng)等諸多優(yōu)點(diǎn)；因此,，慢病毒己經(jīng)成為表達(dá)外源基因或外源shRNA的常用載體形式之一,， 并且應(yīng)用越來越廣泛。

慢病毒濃縮液介紹

EZ慢病毒濃縮液是一種快速濃縮慢病毒的產(chǎn)品,，使用未濃縮病毒上清與本產(chǎn)品低溫孵育后低速離心即可獲得濃縮病毒液,。不同于傳統(tǒng)的耗時(shí)耗力的超濾、超速離心法,，使用本產(chǎn)品操作簡便,、快捷、安全,，回收率高,。

慢病毒濃縮液優(yōu)勢

 ? 高濃縮比：濃縮體積高達(dá)240倍，如：可將120mL的病毒上清濃縮至500uL,；

 ? 高回收率：經(jīng)測試,，病毒的回收率高達(dá)92%,；

 ? 高濃縮滴度：經(jīng)測試，使用本產(chǎn)品濃縮后病毒滴度往往可達(dá)108或109高病毒,；

 ? 高病毒活性：濃縮后病毒具有更佳的轉(zhuǎn)導(dǎo)效果,。

慢病毒濃縮液操作步驟

① 收集 48 h 和 72 h 的 293T 細(xì)胞慢病毒上清液，4℃,， 2000 g 離心 10 min,。 

② 上清液用 0.45 μm 濾膜過濾，去除細(xì)胞碎片,?！咀ⅰ浚簽V膜需使用低蛋白吸附的纖維素醋酸酯或聚醚 砜(PES)膜。切忌用硝酸纖維素膜(NC),。 

③ 按慢病毒過濾液體積:濃縮試劑體積= 4:1 比例混合,，搖勻，4℃ 靜置過夜,，或冰上孵育至少 3 h,，適當(dāng) 延長孵育時(shí)間可提高慢病毒的回收率。 

④ 完成孵育后,，4℃,，3500 g 離心 15 min，小心吸去上清液,。

⑤ 用適量體積 PBS 輕輕反復(fù)吹吸病毒沉淀,，重懸慢病毒。 

⑥ 留少許病毒液測定滴度,，其他分裝后保存于-80℃,。【注】：因凍融會顯著降低慢病毒活性,，請務(wù)必分 裝保存,。

慢病毒濃縮液注意事項(xiàng)

 • 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷,、治療等領(lǐng)域,。

 • 慢病毒相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作請?jiān)谏锇踩駜?nèi)完成。

 • 注意將濃縮試劑和病毒液充分混合,。

 • 細(xì)胞的生長狀態(tài)對于病毒包裝至關(guān)重要,，因此需保證良好的細(xì)胞生長狀態(tài)和較少的細(xì)胞傳代次數(shù)。

 • 病毒切勿反復(fù)凍融,，如果實(shí)在需要凍融,，次數(shù)盡量不要超過 3 次，每凍融一次大約有 10%左右的病毒損失，應(yīng)按照每次使用的病毒量來分裝,，保存于-80℃,。保存時(shí)間盡量不要超過 6 個(gè)月。