日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

sirna轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)步驟（以 24 孔板為例）

1． 接種細(xì)胞

對(duì)于貼壁細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前一天，將細(xì)胞按照每孔1-2x10^5個(gè)細(xì)胞的量進(jìn)行鋪板,，使其在轉(zhuǎn)染時(shí)密度為60%-80% 為佳,。

對(duì)于懸浮細(xì)胞：轉(zhuǎn)染當(dāng)天，配制轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物之前,，用PBS清洗細(xì)胞1-2次,，用250 μL Opti-MEM I 減血清培養(yǎng)基 (無(wú)血清) 重懸細(xì)胞,，在24孔板中進(jìn)行細(xì)胞鋪板，細(xì)胞密度為60-80%,。

2． 準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染試劑-siRNA復(fù)合物（或轉(zhuǎn)染試劑-miRNA復(fù)合物）

(1) 對(duì)于每孔細(xì)胞,，取2 μLsiRNA (20 μM，DEPC水溶解)加入到1.5mL離心管中,，加入2 μL轉(zhuǎn)染試劑與siRNA 混合,，室溫孵育3 min。

(2) 往上述混合物中加入100 μL Opti-MEM I減血清培養(yǎng)基(無(wú)血清),，輕輕混勻,，在室溫下靜置30 min，形成轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物,。

(3) 30 min后,，往上述復(fù)合物中加入250 μLOpti-MEM I減血清培養(yǎng)基(無(wú)血清)，輕輕混勻,。

3． 轉(zhuǎn)染細(xì)胞

(1) 細(xì)胞用PBS清洗1-2次,，將上述350µL轉(zhuǎn)染試劑-siRNA復(fù)合物加入每孔細(xì)胞。

(2) 在 37℃,，5% CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng) 24-48 h,，無(wú)需更換新的培養(yǎng)液，之后即可檢測(cè)基因干擾效果或者后續(xù)功能實(shí)驗(yàn),。注：可在轉(zhuǎn)染12h后補(bǔ)充500 μL完培養(yǎng)基 (含血清),。

siRNA轉(zhuǎn)染試劑推薦

EZ Trans siRNA轉(zhuǎn)染試劑，是一種基于陽(yáng)離子高分子聚合物開(kāi)發(fā)的新型轉(zhuǎn)染試劑,，適用于siRNA 及microRNA (miRNA) 的轉(zhuǎn)染,。本產(chǎn)品能在多種常見(jiàn)細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)高效率、低毒性的轉(zhuǎn)染效果,，且具有操作簡(jiǎn)便,，重復(fù)性佳等優(yōu)點(diǎn)，適用于 siRNA或miRNA 介導(dǎo)的基因抑制實(shí)驗(yàn),。