提到蛋白提取,，大家不約而同會想到RIPA裂解液,，裂解液加入樣品中,，離心即可完成蛋白的提取。然而RIPA裂解液我們真的用對了嗎,？RIPA裂解液是從動物細胞或組織中提取蛋白的常用裂解液,，其工作原理是利用去污劑（表面活性劑）裂解細胞膜和核膜，從而獲取細胞和組織中的RIPA可溶性蛋白,。
RIPA裂解液的選擇
RIPA裂解液中主要包含去污劑,，緩沖體系，等滲體系,，變性劑、穩(wěn)定劑等,。其中去污劑是細胞裂解液中重要成分,，是由疏水尾端基團和極性親水頭端基團組成的兩性分子，它們能夠降低水的表面張力,，所以也被稱為表面活性劑,，起到破壞脂質(zhì)雙分子層、破裂細胞以及溶解蛋白等作用,。
去污劑的類型
不同類型的去污劑對樣品的裂解效率有所不同,，RIPA裂解液有多種配方，通常會使用不同類型的去污劑組合和不同的去污劑濃度,，故不同配方的RIPA裂解液能溶解出的蛋白量和蛋白種類會有較大差異,，獲得的蛋白圖譜會有所不同，從而導(dǎo)致后續(xù)實驗的檢測結(jié)果也會產(chǎn)生差異結(jié)果,。需要根據(jù)實驗樣品和下游實驗嘗試選擇合適的RIPA裂解液配方,。
使用ripa裂解液的注意事項
• 由于多數(shù)RIPA裂解液裂解強度較為溫和，對胞質(zhì)中的可溶性蛋白和部分高表達于細胞膜,、細胞核上的蛋白提取較為有效,，故RIPA裂解液適于這類蛋白的提取，推薦用于WB實驗中的定性檢測,。
• RIPA裂解液提取蛋白時,，經(jīng)離心后會產(chǎn)生兩個組分即RIPA可溶組分（上清）和RIPA不可溶組分（白色沉淀），屬正常情況,。盡量避開沉淀吸取上清用于下游實驗,。
• 如樣品加入RIPA裂解液后出現(xiàn)較為黏稠狀態(tài)，說明樣品裂解過于充分,，無法去除核酸殘團的情況下,，需要使用強度更低的裂解液配方，增加超聲處理或更換總蛋白提取試劑盒（李記生物Cat：AP01L204）,，柱式法可以利用離心柱將核酸殘團進行截留解決樣品黏稠問題,，無不可溶組分，可獲得更完整的蛋白圖譜。
• 使用RIPA裂解液提取組織樣品時,，由于組織樣品差異較大,，從不同樣品中高效提取組織蛋白具有挑戰(zhàn)性，例如纖維組織和膠原組織（如心臟和腎臟）和軟組織（如脾臟和肝臟）需要采用不同的研磨方案匹配,，才能獲得較佳結(jié)果,。
ripa裂解液推薦
【貨號】：AP01L013、AP01L014
【規(guī)格】：50mL,、100mL
【品牌】：李記生物
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