近年來(lái),，通過(guò)輸注免疫細(xì)胞或干細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)疾病的治療取得良好療效，細(xì)胞治療技術(shù)展示出越來(lái)越廣闊的臨床應(yīng)用前景,。通常細(xì)胞從采集到臨床應(yīng)用會(huì)間隔很長(zhǎng)時(shí)間,，而新鮮細(xì)胞產(chǎn)品保存時(shí)限較短，為了延長(zhǎng)細(xì)胞保存時(shí)限或長(zhǎng)期保存細(xì)胞產(chǎn)品,，需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行冷凍后儲(chǔ)存,。
細(xì)胞冷凍保存的原理
細(xì)胞凍存是通過(guò)冷凍保護(hù)機(jī)制將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，減少細(xì)胞代謝,，保持細(xì)胞活性,，以便長(zhǎng)期儲(chǔ)存的一種技術(shù)。細(xì)胞復(fù)蘇后,，蛋白質(zhì)仍有活性,，細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能仍完好,。
隨著溫度降低，細(xì)胞內(nèi)外的水分都會(huì)結(jié)晶,，所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞,，特別是0~-20℃的階段，冰晶呈針狀,，極易引發(fā)細(xì)胞損傷,。在不加任何保護(hù)劑條件下直接凍存細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境中形成的冰晶,，能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷,、電解質(zhì)升高、滲透壓改變,、脫水,、pH改變,、蛋白變性等,，引起細(xì)胞死亡。
如果在細(xì)胞溶液中加入冷凍保護(hù)劑,，可保護(hù)細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷和冰晶損傷,。冷凍保護(hù)劑容易同水分子結(jié)合，降低冰點(diǎn),，在緩慢的凍結(jié)條件下,，能使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)形成冰晶前透出細(xì)胞，并且通過(guò)降低未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度,，使細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷,，細(xì)胞得以在超低溫（液氮）條件下保存。冷凍保護(hù)劑對(duì)細(xì)胞的冷凍保護(hù)效果還與冷凍速率,、冷凍溫度和復(fù)溫速率有關(guān),，且不同的冷凍保護(hù)劑其冷凍保護(hù)效果也不一樣。
細(xì)胞冷凍保護(hù)劑
細(xì)胞冷凍保護(hù)劑可以根據(jù)否穿透細(xì)胞膜分為滲透性和非滲透性兩種,。滲透性冷凍保護(hù)劑可以透過(guò)細(xì)胞膜滲透到細(xì)胞內(nèi),，多為小分子，包括二甲基亞砜(DMSO),、甘油,、乙二醇、丙二醇,、甲醇,、乙醇等，這類(lèi)保護(hù)劑能夠在細(xì)胞冷凍懸液凝固之前,，穿過(guò)細(xì)胞膜滲透到細(xì)胞內(nèi),，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,，從而減少細(xì)胞損傷。DMSO是臨床級(jí)凍存保護(hù)劑中重要的成分,，目前經(jīng)典的凍存保護(hù)劑中通常含有10%左右的DMSO,。DMSO是常用的凍存保護(hù)劑和常用藥用輔料，在國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心藥用輔料數(shù)據(jù)庫(kù)可以查詢到其詳細(xì)信息,。非滲透性冷凍保護(hù)劑一般是一些大分子物質(zhì),，不能滲透到細(xì)胞內(nèi)，主要包括右旋糖苷,、蔗糖,、聚乙二醇、葡聚糖,、白蛋白等,，其可以優(yōu)先同溶液中的水分子相結(jié)合，使冰點(diǎn)降低,，減少冰晶的形成,。由于其分子量大，可以使溶液中電解質(zhì)濃度降低,，從而減輕溶質(zhì)損傷,，同時(shí)能降低溶液中低分子溶質(zhì)（電解質(zhì)）濃度，減輕鹽損傷,。
細(xì)胞冷凍保存的一般流程
細(xì)胞凍存過(guò)程要緩慢,，復(fù)蘇則相反，應(yīng)快速升溫,。慢凍的原因如上所述,，為了避免降溫時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的水分還未來(lái)得及脫離細(xì)胞,，但卻形成冰晶,，對(duì)細(xì)胞造成損傷。（1）凍存前觀察細(xì)胞狀態(tài),，測(cè)定細(xì)胞活率和計(jì)數(shù),。（2）將要凍存的細(xì)胞收集于離心管中，1200~1800rpm,，離心5min,，棄上清。（3）根據(jù)需要調(diào)整細(xì)胞凍存密度,，緩慢加入適當(dāng)體積配制好預(yù)冷的凍存液或市售的無(wú)血清細(xì)胞凍存液,，重懸細(xì)胞。（4）將細(xì)胞懸液分裝至凍存管中,，旋緊管蓋,，做好標(biāo)記,。（5）將凍存管放入程序降溫盒（預(yù)冷）內(nèi)，然后放至-80℃冰箱過(guò)夜,，次日轉(zhuǎn)移至液氮罐中長(zhǎng)期保存,。
如何選擇細(xì)胞凍存液
細(xì)胞凍存液的質(zhì)量和成分對(duì)細(xì)胞的凍存效果有很大的影響。如果細(xì)胞凍存液的成分不合適或質(zhì)量不達(dá)標(biāo),，可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞凍存失敗或細(xì)胞復(fù)蘇后存活率低,。
選擇細(xì)胞凍存液時(shí)，應(yīng)考慮以下3個(gè)重要因素：
（1）細(xì)胞類(lèi)型,，不同的細(xì)胞類(lèi)型對(duì)細(xì)胞凍存液的成分和濃度有不同的要求,。
（2）凍存時(shí)間，細(xì)胞凍存的時(shí)間越長(zhǎng),，對(duì)細(xì)胞凍存液的要求越高,。
（3）復(fù)蘇率，細(xì)胞凍存液的質(zhì)量和成分對(duì)細(xì)胞的復(fù)蘇率有很大的影響,。
下面給你介紹下李記生物~李記生物細(xì)胞凍存液的主要產(chǎn)品：
藥輔級(jí)細(xì)胞凍存液（非程序降溫）
快速細(xì)胞凍存液（GMP級(jí)）
無(wú)血清細(xì)胞凍存液（無(wú)DMSO）
無(wú)血清細(xì)胞凍存液（增強(qiáng)型）
快速細(xì)胞凍存液（無(wú)血清,、無(wú)蛋白）
和元李記快速細(xì)胞凍存液（無(wú)血清,、無(wú)蛋白）可適應(yīng)于絕大部分腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞，大部分干細(xì)胞（和元李記已測(cè)試細(xì)胞種類(lèi)請(qǐng)關(guān)注）,，凍存細(xì)胞可在 -80℃ 長(zhǎng)期保存（＞6年）。不含動(dòng)物源性蛋白,，不含血清成分,，可有效減少各類(lèi)細(xì)菌、病毒和支原體等污染,，保證凍存細(xì)胞的安全,。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,，提高細(xì)胞存活率和活力,，亦適合于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。
無(wú)需程序性降溫,，可直接將細(xì)胞放入凍存液置于-80℃冰箱（-80℃可保存＞6年）,，凍存液無(wú)需稀釋。
凍存液不含血清,，大大降低細(xì)胞污染可能性,。
不要加血清，不要反復(fù)逐級(jí)降溫,，不要液氮,，綜合下來(lái)省時(shí)更省錢(qián),。
案列可于-資源支持查詢！
各細(xì)胞凍存數(shù)據(jù),，可參考下方李記凍存液數(shù)據(jù)庫(kù)（數(shù)據(jù)由使用客戶反饋）
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
| 快速細(xì)胞凍存液（無(wú)血清,、無(wú)蛋白） | AC05L032 | 30mL |
| 快速細(xì)胞凍存液（無(wú)血清、無(wú)蛋白） | AC05L033 | 100mL |
常溫運(yùn)輸,。4℃保存,，有效期24個(gè)月。
產(chǎn)品描述
李記生物無(wú)血清細(xì)胞凍存液（無(wú)DMSO）適用于多種細(xì)胞的冷凍保存,，尤其適用于原代肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等的凍存,。
訂購(gòu)信息
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
| 無(wú)血清細(xì)胞凍存液（無(wú)DMSO） | AC05L164 | 100mL |
產(chǎn)品參數(shù)
| pH值： | 25±2℃時(shí),，7.2-7.8 |
| 細(xì)菌： | 陰性 |
| 真菌： | 陰性 |
| 支原體： | 陰性 |
運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。4℃密封保存,，有效期12個(gè)月,。
產(chǎn)品描述
李記生物無(wú)血清細(xì)胞凍存液（增強(qiáng)型）適用于常用動(dòng)物細(xì)胞系的冷凍保存,，尤其適用于原代細(xì)胞,、干細(xì)胞等的冷凍保存。
訂購(gòu)信息
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
| 無(wú)血清細(xì)胞凍存液（增強(qiáng)型） | AC05L053 | 100mL |
產(chǎn)品參數(shù)
| 外觀： | 淡黃色澄清溶液 |
| pH值： | 25±2℃時(shí),，7.2-7.8 |
| 細(xì)菌： | 陰性 |
| 真菌： | 陰性 |
| 支原體： | 陰性 |
| 內(nèi)毒素： | <1 EU/mL |
運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸,。4℃密封保存，有效期24個(gè)月,。
和元李記快速細(xì)胞凍存液（GMP級(jí)）不含動(dòng)物源性蛋白，不含血清成分,，可有效減少各類(lèi)細(xì)菌,、病毒和支原體等污染，保證凍存細(xì)胞的安全,。通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株,，尤其適用于各類(lèi)原代細(xì)胞、干細(xì)胞及雜交瘤等蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存,。
本產(chǎn)品含多種保護(hù)劑,、穩(wěn)定劑組合，可顯著降低凍存過(guò)程中溶液冰點(diǎn),，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,，有效防止冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷；同時(shí)降低冰凍時(shí)細(xì)胞周?chē)娊赓|(zhì)濃度,，避免電解質(zhì)損傷,；還可延緩凍存過(guò)程中細(xì)胞的互相擠壓,，保護(hù)細(xì)胞膜。從而極大提高細(xì)胞復(fù)蘇率和活力,。
便捷：即用型,，無(wú)需程序性降溫，可直接將細(xì)胞放入凍存液置于-80℃冰箱,，也可在后續(xù)轉(zhuǎn)移至液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存,。
高效：細(xì)胞存活率和復(fù)蘇活力高，普遍高于90% ,。
安全：無(wú)血清,，無(wú)動(dòng)物源成分，化學(xué)成分明確,，大大降低細(xì)胞污染可能性,。
質(zhì)優(yōu)：嚴(yán)格的質(zhì)量控制，產(chǎn)品性能媲美進(jìn)口,；所有原料均選自經(jīng)嚴(yán)格檢測(cè)的低內(nèi)毒素,、高純藥用級(jí)別原料，采用低DMSO配方,，注射用水配置符合GMP生產(chǎn),。
批間差異小：全程于GMP潔凈車(chē)間生產(chǎn)與包裝,，并經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的內(nèi)毒素,、滲透壓、 PH,、細(xì)菌病原體等質(zhì)量檢測(cè),，確保產(chǎn)品質(zhì)量及批次間的一致性。
適用范圍廣：通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株,，尤其適用于各類(lèi)原代細(xì)胞、干細(xì)胞及雜交瘤等蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存,；已通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明不不會(huì)影響干細(xì)胞表型和生長(zhǎng)狀態(tài),，且可維持干細(xì)胞的多分化性。
案列可于-資源支持查詢,！
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
| 快速細(xì)胞凍存液（GMP級(jí)） | AC05L043 | 100mL |
藍(lán)冰運(yùn)輸,。4℃保存，有效期12個(gè)月,。
產(chǎn)品描述
藥輔級(jí)細(xì)胞凍存液（非程序降溫）是由李記生物自主研發(fā)的含有7.5% DMSO，無(wú)血清,、無(wú)動(dòng)物成分的即用型細(xì)胞凍存液,，在超低溫（-80℃～-196℃）環(huán)境下為細(xì)胞提供一個(gè)安全,、有效的保護(hù)環(huán)境，凍存復(fù)蘇后細(xì)胞活率可達(dá)90%以上,。
本產(chǎn)品含有甘氨酸,，DMSO以及磷酸鹽緩沖液的水溶液，適用于間充質(zhì)干細(xì)胞的冷凍保存,。
訂購(gòu)信息
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
| 藥輔級(jí)細(xì)胞凍存液（非程序降溫） | AC05L174 | 100mL |
產(chǎn)品參數(shù)
| 外觀： | 澄清透明溶液 |
| 裝量： | 應(yīng)不低于標(biāo)示裝量 |
| pH值： | 7.0～7.6（25±2℃） |
| 滲透壓： | 1650～2025 mOsmol/Kg |
| 無(wú)菌： | 應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng) |
| 支原體： | 應(yīng)符合規(guī)定 |
| 內(nèi)毒素： | ＜0.25EU/mL |
運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸,。4℃密封保存，有效期24個(gè)月,。
本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域,。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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