產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 保存 | 價格(元) |
D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素鉀鹽*（超純） | C6301L1330 | 25 mg | -20℃ | 650 |
產(chǎn)品描述
D-Luciferin Free acid, potassium salt, and sodium salt *UltraPure Grade*D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物,，普遍用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域,，特別是體內(nèi)活體成像技術(shù)。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,，熒光素（底物）能夠被氧化發(fā)光,。當(dāng)熒光素過量時，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性（見下圖）,。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后,，導(dǎo)入研究動物如大小鼠體內(nèi)，之后注入熒光素,，通過生物發(fā)光成像技術(shù)（BLI）來檢測光強(qiáng)度變化,，從而實(shí)時監(jiān)測疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或藥物的治療功效等。也可以利用ATP對此反應(yīng)體系的影響,，根據(jù)生物發(fā)光強(qiáng)度的變化來指示能量或生命體征,。
D-熒光素也常用于體外研究，包括熒光素酶和ATP水平分析,；報告基因分析,；高通量測序和各種污染檢測。目前市場上有三種產(chǎn)品形式,，D-熒光素（游離酸）,，D-熒光素鈉鹽，以及D-熒光素鉀鹽,。這三種產(chǎn)品主要的差別在于溶解特性上,。D-熒光素（游離酸）水溶性以及緩沖體系的溶解性都很弱，除非溶于弱堿如NaOH和KOH溶液,。溶于甲醇（10 mg/ml）和DMSO（50 mg/ml）,。但鈉鹽和鉀鹽形式的D-熒光素能夠非常容易且快速的溶入水或者緩沖液中，使用方便,，溶劑無毒性,，特別適合體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。配成液體后的這三種產(chǎn)品,，在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實(shí)質(zhì)性的差別,。
產(chǎn)品性質(zhì)
中文別名（Chinese synonym） | D-熒光素鉀鹽 |
英文別名（English synonym） | (S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt; D-Luciferin firefly, potassium salt; |
CAS號（CAS NO.） | 115144-35-9 |
分子式（Formula） | C11H7N2O3S2 K |
分子量（Molecular weight） | 318.42 g/mol |
外觀（Appearance） | 淡黃色粉末 |
溶解性（Solubility） | 溶于水（60 mg/ml） |
純度（Purity）（HPLC） | ＞99% |
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存,，保質(zhì)期12個月,。
使用方法
1．體外生物發(fā)光檢測
1）用蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽，配制成100 mM的儲存液（200×,，濃度30mg/ml）,?；靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b于-20℃或-80℃凍存，避免反復(fù)凍融,。
2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基1:200稀釋儲存液,，配制工作液（終濃度150µg/ml）。
3）去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基直至無殘留,。
4）待圖像分析前,，向細(xì)胞內(nèi)添加1×熒光素工作液，然后進(jìn)行圖像分析（或者細(xì)胞放在37℃短時間孵育后檢測可增強(qiáng)信號）,。
2． 活體成像分析
1）用無菌的DPBS（w/o Mg2+）配制D-熒光素鉀鹽工作液（15mg/ml）,，0.2µm濾膜過濾除菌?；靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b于-20℃或-80℃凍存,，避免反復(fù)凍融。一旦使用,，放到4℃解凍,，保持冰冷且避光。
2） 注射量取決于注射方式,，具體如下：
注射方式 | 劑量 |
靜脈注射（25-27gauge針頭） | 按10µl/g體重濃度,，加入相應(yīng)體積的15mg/ml熒光素工作液 |
腹腔注射（25-27gauge針頭） | 按10µl /g體重濃度，加入相應(yīng)體積的15mg/ml熒光素工作液 |
肌肉注射（27gauge針頭） | 50µl,，濃度為1-2mg/ml熒光素工作液 |
鼻內(nèi)注射（pipette） | 50µl,，濃度為3mg/ml熒光素工作液 |
3） 注射入體內(nèi)10-20 min（待光信號達(dá)到zui強(qiáng)穩(wěn)定平臺期），再進(jìn)行成像分析,。
注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線,，從而確定zui高信號檢測時間和信號平臺期。
注意事項(xiàng)
1) 本品（firefly luciferin）和甲蟲熒光素（beetle luciferin）都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl) -2-thiazoline-4-carboxylic acid,，僅僅是不同公司在命名上的差異,。
2) 本品保存和操作的過程中都要避光。另外水溶性儲存液過濾除菌后,，可以-20℃或-80℃分裝凍存,，避免反復(fù)凍融。如果有條件,，對儲存液充氮?dú)饣驓鍤猓ǚ乐寡趸?，穩(wěn)定性和保存時間更長，長達(dá)1年,。
3) 注射方式,，動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射，因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動力學(xué)曲線，確定*信號平臺期和*的檢測時間,。
4) 熒光素鉀鹽和熒光素鈉鹽應(yīng)用上沒有差別,，兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性,。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽,。從目前發(fā)表的文獻(xiàn)來看，鉀鹽的使用率遠(yuǎn)高于鈉鹽,，尤其是體內(nèi)實(shí)驗(yàn),。兩者功效相同。
5) 為了您的安全和健康,，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。
1、 熒光素可以用于動物活體嗎,？
答：我們許多客戶用熒光素作用于動物活體,，目前世界上合成熒光素主要有兩大生產(chǎn)商，因此目前您使用的就是這兩種生產(chǎn)商其中之一生產(chǎn)的,。請注意：Promega出售的熒光素是Beetle Luciferin,，而我們公司出售的是Firefly Luciferin，但這兩種的結(jié)構(gòu)是相同的（結(jié)構(gòu)式如下）,。
2,、 怎么溶解熒光素？溶解后怎樣使它穩(wěn)定,？
答：許多客戶已經(jīng)告訴我們熒光素溶于水中,，然后分裝好保存于-80℃，不會有重大的影響,。然而,，關(guān)于溶解后熒光素的穩(wěn)定性也有相矛盾的報道。對于大多敏感的實(shí)驗(yàn),，為了減少一些實(shí)驗(yàn)中的可變因素我們強(qiáng)烈建議您現(xiàn)配現(xiàn)用（比如低濃度的酶或者不合適的反應(yīng)溫度或不合適的鹽濃度等等可能需要高濃度的底物來驅(qū)使反應(yīng)的完成,。）
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和元李記（上海）生物技術(shù)有限公司 | 下載次數(shù) |
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