半制備/制備型液相色譜柱的系統(tǒng)由儲液器,、泵,、進(jìn)樣器、色譜柱,、檢測器,、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),,樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),,在兩相中作相對運(yùn)動時,,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來,。
半制備/制備型液相色譜柱是液相色譜儀上分離樣品的一款關(guān)鍵的產(chǎn)品與耗材,,使用次數(shù)增多時,會出現(xiàn)柱效下降,,峰高降低,,峰寬加大或者肩峰狀況。 一般的使用者可能會馬上更換色譜柱,,其實(shí)有些問題可以通過定期的清洗和再生來延長液相色譜柱的使用壽命 ,。
半制備/制備型液相色譜柱如何提高使用壽命呢?
1,、反相色譜柱的沖洗與再生方法:
分別用甲醇:水=90:10,、純甲醇、二氯甲烷等溶劑著流動相,,依次沖洗,,每種流動相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的色譜柱體積。然后再以相反的次序沖洗,。
2,、正相色譜柱的清洗與再生方法
分別用正己烷,、異丙醇、二氯甲烷,、甲醇等溶劑做流動相,,順次沖洗,每種流動相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的柱體積(異丙醇粘度大,,可降低流速,,避免壓力過高)。注意使用溶劑的次序不要顛倒,,用甲醇沖洗完后,,再以相反的次序沖洗至正己烷。所有的流動相必須嚴(yán)格脫水,。
3,、離子交換柱的再生
長時間在緩沖溶液中使用和進(jìn)樣,將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力下降,,,。用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。
用戶還可以選擇能溶解柱內(nèi)污染物的溶劑為流動相做正方向和反方向沖洗,。但再生后的色譜柱柱效是不可能恢復(fù)到新柱的水平的,。
如果柱子裝反了,可以調(diào)回來,,但可能會造成柱內(nèi)擔(dān)體塌陷,。在不得已的情況下盡量不要反裝色譜柱。