液相色譜柱是液相色譜的心臟,在液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效,、容量和滲透特性,延長(zhǎng)柱子的使用壽命非常重要,。色譜柱使用時(shí)間后就會(huì)出現(xiàn)柱壓升高,、柱效降低,、峰形畸變和分離度降低、保留時(shí)間改變等變化,如不采取措施,將會(huì)縮短色譜柱的使用壽命,影響工作效率,并造成一定的經(jīng)濟(jì)損失,。因此,有必要加強(qiáng)和規(guī)范色譜柱的管理,從而延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命,。
液相色譜柱使用一段時(shí)間后,常遇到柱子被污染,柱效會(huì)有一定程度的下降,采用適當(dāng)?shù)姆椒▽?duì)色譜柱進(jìn)行保護(hù),可以延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。樣品和流動(dòng)相的處理:溶解的樣品進(jìn)樣前用濾膜過(guò)濾,以除去不溶物,。如果必要,需進(jìn)行樣品的預(yù)處理。流動(dòng)相中如有不純物質(zhì)將影響柱效,所以溶劑盡量使用色譜級(jí)別的,至少是分析純級(jí)別,流動(dòng)相使用前用微孔薄膜過(guò)濾,。在流動(dòng)相的輸液管前安裝過(guò)濾器,。過(guò)濾器定期用甲醇超聲清洗,如果效果不好,可用10%的稀硝酸浸泡清洗。對(duì)于堵塞嚴(yán)重的過(guò)濾器,可在火焰上灼燒后再清洗,。保護(hù)柱(預(yù)柱)的使用:對(duì)于較昂貴的色譜柱,可以在柱前加一保護(hù)柱,防止樣品中雜質(zhì)污染分析柱,對(duì)于制備柱,因其進(jìn)樣量大,使用保護(hù)柱尤為重要,。
液相色譜柱的使用注意事項(xiàng):
色譜柱的柱效和保護(hù)柱
拿到一根新柱時(shí),一定要先看其使說(shuō)明,,然后測(cè)柱效,,定期檢測(cè)柱效,, 保留在新色譜柱上得到的色譜圖,并記錄條件,, 定期檢測(cè)儀器的譜帶展寬,。 若應(yīng)用于在線監(jiān)測(cè), 應(yīng)對(duì)色譜柱提供在線的物理保護(hù)和化學(xué)保護(hù),, 例如采取安裝在線過(guò)濾器,, 自裝填料保護(hù)柱和預(yù)裝保護(hù)柱等。在線過(guò)濾器的作用是防止顆粒在柱頭累計(jì),,優(yōu)點(diǎn)是基本不影響柱效,, 在需要高柱效的時(shí)候常用, 常更換的消耗品是濾芯和墊圈保護(hù)柱的作用是防止柱子被化學(xué)污染,。 缺點(diǎn)是多數(shù)保護(hù)柱影響色譜柱的柱效,, 特別是在用微柱時(shí),常用的是普通 自裝填料的保護(hù)柱,。zui近新出的一些保護(hù)柱例如S e n t r y - g u a r d保護(hù)柱,, 它的特點(diǎn)是高質(zhì)量、 高 效填料,、 增加分析柱效,、 對(duì)臟樣品載荷能力大 , 能延長(zhǎng)保護(hù)柱的壽命,,手可擰緊接頭,,安裝時(shí)不需要工具, 省時(shí)省,, 可換芯式設(shè)計(jì),, 能采用各種不同的填料, 主要適用于非常臟非常復(fù)雜的樣品本底,, 例如生化樣品,, 環(huán)境樣品和食品等,或者不想做太多的圃相萃取,,不想降低柱效果等情況,。
色譜柱的清洗
對(duì)所做的樣品要有充分的了解,用對(duì)該樣品洗脫能力zui強(qiáng)的流動(dòng)相清洗,,對(duì)于硅膠柱,,先用甲醇洗去極性雜質(zhì),然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷 1 0 0 - 2 0 O r aL依次活化,,對(duì)于鍵和相柱,,一般用甲醇一氯仿一甲醇一水依次沖洗,每種色譜柱有特定的清洗方法,,一定要看其使用說(shuō)明
色譜柱的存放
存放前除去雜質(zhì)和鹽,,采用合適的存放溶劑,,避免色譜柱床的干枯,避免機(jī)械振動(dòng),,防止細(xì)菌生長(zhǎng),,注意存放的溫度。