液相色譜柱是液相色譜的心臟,在液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效,、容量和滲透特性,延長柱子的使用壽命非常重要,。色譜柱使用時間后就會出現(xiàn)柱壓升高,、柱效降低,、峰形畸變和分離度降低、保留時間改變等變化,如不采取措施,將會縮短色譜柱的使用壽命,影響工作效率,并造成一定的經(jīng)濟損失,。因此,有必要加強和規(guī)范色譜柱的管理,從而延長色譜柱的使用壽命,。本文從影響色譜柱使用壽命的幾個因素出發(fā),從管理的角度,探討色譜柱的維護與保養(yǎng)。
液相色譜柱的系統(tǒng)由儲液器,、泵,、進樣器、色譜柱,、檢測器,、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內, 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運動時, 經(jīng)過反復多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內流出, 通過檢測器時, 樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來,。
液相色譜柱的原理結構:
a,、空柱由柱接頭,、柱管及濾片組裝而成,。
柱接頭采用低死體積結構,柱接頭是兩端螺紋組件,,一端是為7/16英寸內螺紋,,另一端是3/16英寸的內螺紋(國內外已規(guī)范化),。7/16英寸內螺紋與1/4英寸柱管(Φ6.35mm)連接,中間放置壓環(huán)用于密封,。3/16英寸的內螺紋與1/16英寸(Φ1.57mm)的連接管連接,,中間也放置壓環(huán)用于柱接頭的密封。為了盡量減少柱外死體積,,在安裝色譜柱時,,用Φ1.57mm連接管通過空心螺釘壓環(huán)后要盡量插到底,然后再擰緊空心螺釘,。壓環(huán)被空心螺釘擠壓變形后緊箍在連接管上(連接管通過壓環(huán)后露出的管長度應嚴格控制在2.5mm長或其他固定尺寸),。
在兩端柱接頭內,柱管兩端各放置一片不銹鋼濾片(或濾網(wǎng)),,用于封堵柱填料不被流動相沖出柱外而流失,。空柱各組件均為316L不銹鋼材質,,能耐受一般的溶劑作用,。但由于含氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,,柱及連接管內不能長時間存留此類溶劑,,以避免腐蝕。
b,、柱填料:
液相色譜柱的分離作用是在填料與流動相之間進行的,,柱子的分類是依據(jù)填料類型而定。
正相柱:多以硅膠為柱填料,。根據(jù)外型可分為無定型和球型兩種,,其顆粒直徑在3-10 μm的范圍內。另一類正相填料是硅膠表面鍵合-CN,,-NH2等官能團即所謂的鍵合相硅膠,。
反相柱:主要是以硅膠為基質,在其表面鍵合十八烷基官能團(ODS)的非極性填料,。也有無定型和球型之分,。
常用的其他的反相填料還有鍵合C8、C4,、C2,、苯基等,其顆粒粒徑在3-10 μm之間,。