10
當(dāng)前位置：大連依利特分析儀器有限公司>>技術(shù)文章>>Thermo液相色譜柱如何選型
Thermo液相色譜柱如何選型
Thermo液相色譜柱通常分為正相柱和反相柱,。正相柱大多以硅膠為柱,，或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主要以硅膠為基質(zhì),，在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(ODS)稱為C18柱，其它常用的反相柱還有C8,C4,C2和苯基柱等,。另外還有離子交換柱,，GPC柱，聚合物填料柱等,。
Thermo液相色譜柱優(yōu)點是固定相穩(wěn)定,，應(yīng)用廣泛，可使用多種溶劑,。但硅膠為基質(zhì)的填料,，使用時一定要注意流動相的PH范圍。一般的C18柱PH值范圍都在2-8,，流動相的PH值小于2時,，會導(dǎo)致鍵合相的水解;當(dāng)PH值大于7時硅膠易溶解;經(jīng)常使用緩沖液固定相要降解。一旦發(fā)生上述情況,，色譜柱人口處會塌陷,。同樣填料各種不同牌號的色譜柱不盡相同。如果流動相PH較高或經(jīng)常使用緩沖液時,，建議選擇PH范圍大的柱子,。
Thermo液相色譜柱如何選型：
在選擇Thermo液相色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質(zhì),，他們的類型結(jié)構(gòu),、極性、酸堿性,、分子量大小等等,，
1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測，即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱
2. 如果樣品極性太強,，或酸性太強;可以選擇CN,，NH2，或硅膠柱,，HILIC(親水色譜),，也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長，對流動相pH要求比較精密,，否 則很難重復(fù)實驗,，另外離子對試劑很難洗下來，基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗)
3. 若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),，且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),，他們都會減少堿性化合物的拖尾，一般會選擇中性或偏堿的條件下做,，因為這樣可增加堿性樣品的保留
4.如果堿性化合物的極性太強,，或堿性太強;可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優(yōu)點是方法開發(fā)簡單,，缺點是目前實 現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少，價格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,，這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇強離子交換柱(缺點 是不能用來分析其它樣品,，對流動相pH要求比較精密，否則很難重復(fù)實驗)也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱,。
Thermo液相色譜柱在使用前,，進行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來,，作為今后評價柱性能變化的參考,。在做柱性能測試時要按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是*條件)，只有這樣,，測得的結(jié)果才有可比性,。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相,、柱溫等條件的差異而有所不同,。