空心膠囊多由藥用明膠加輔料精制而成的帽,、體兩節(jié)膠囊殼組成,，主要用于盛裝固體顆粒藥物。如自制散劑,、保健品,、藥劑等，為服用者解決了難入口,、口感差的問題,，真正實現(xiàn)了良藥不再苦口。

為了區(qū)分方便,、外表美觀,、達(dá)到避光等要求，常見空心膠囊多是添加了各種色素,，做成五顏六色的,。但膠囊中使用的色素多為人工合成色素，過量攝入會對身體造成一定的損傷,。我國目前雖暫時沒有統(tǒng)一的法規(guī)來規(guī)范空心膠囊中色素的使用,，但隨著國家和百姓對藥品安全的日益重視，相關(guān)法規(guī)必將會逐漸頒布實施,，膠囊中色素的檢測必將會成為膠囊生產(chǎn)企業(yè)的重要檢測項目之一,。  

依利特公司結(jié)合2015版藥典及文獻(xiàn)資料，對膠囊中色素檢測方法進(jìn)行了摸索和優(yōu)化,，推出膠囊中色素檢測HPLC解決方案,，供相關(guān)行業(yè)工作人員參考使用。

儀器與試劑

實驗過程中其它玻璃器皿還包括容量瓶(10mL),、移液槍(0～1000µL),、移液槍槍頭(1mL)、一次性PVC手套,、一次性口罩,、進(jìn)樣針等若干,。

實驗方法

A 溶液配制

乙酸銨溶液(0.02mol/L)：稱取1.54g乙酸銨，加水至1000mL，溶解,，經(jīng)0.45μm 微孔濾膜過濾。

氨水溶液：量取氨水2mL,，加水至100mL,，混勻。

甲醇-甲酸溶液(6+4,，體積比)：量取甲醇60mL,，甲酸40mL，混勻,。

檸檬酸溶液：稱取20g檸檬酸,，加水至100mL，溶解混勻,。

無水乙醇-氨水-水溶液(7+2+1,體積比)：量取無水乙醇70mL,、氨水溶液20mL、水10mL,，混勻,。

pH為6的水：水加檸檬酸溶液調(diào)pH到6。

pH為4的水：水加檸檬酸溶液調(diào)pH到4,。

混合對照品溶液：分別稱取檸檬黃,、莧菜紅、胭脂紅,、日落黃,、youhuo紅、赤蘚紅,、酸性紅,、喹啉黃各5mg于10mL的容量瓶中,，加水溶解，配制0.5mg/mL的混標(biāo)溶液,，取上述混標(biāo)溶液1mL,，加水稀釋10倍，經(jīng)0.45μm的微孔濾膜過濾配制成每毫升相當(dāng)于50.0μg的合成著色劑,。

B 樣品前處理

1,、 稱取0.5g膠囊外殼加入10mL水，再加入200g/L檸檬酸調(diào)節(jié)pH值為6.0,，于60℃水浴中放置5min,；

2、 將2g聚酰胺粉中加入10mL水(pH=4)調(diào)成粥狀,，倒入樣品溶液中,，攪拌片刻，以G3垂熔漏斗抽濾,，用60℃水(pH=4)洗滌3次,，每次10mL；

3,、 然后用甲醇-甲酸（6:4）的混合溶液10mL,、5mL、5mL洗滌3次,，再用水洗滌至中性,；

4、 用乙醇-氨水-水（7:2:1）混合溶液解吸洗滌3次,，每次5mL,，洗至無色；

5,、 收集解吸液,，蒸發(fā)至近干，加水溶解并定容至10mL,，經(jīng)0.45µL微孔濾膜濾過,。

C 色譜條件

色譜柱：

Supersil ODS-B 5µm I.D.4.6×250mm

流動相：

A-20mmol/L乙酸銨溶液，B-甲醇,；梯度洗脫

流量：1.0 mL/min              

進(jìn)樣體積：10 μL

檢測波長：UV254nm          

柱溫：35

實驗結(jié)果

將樣品提取液和合成著色劑標(biāo)準(zhǔn)使用液分別注入液相色譜儀,根據(jù)保留時間定性,外標(biāo)峰面積法定量,。

參考文獻(xiàn)

[1] GB 5009.35-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中合成著色劑的測定；

[2]《中國藥典》2015版,。