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高效液相色譜知識(shí)介紹
（high performance liquid chromatography,HPLC）也叫高壓液相色譜（high pressure liquid chromatography）,、高速液相色譜（high speed liquid chromatography）,、高分離度液相色譜（high resolution liquid chromatography）等或Efficient liquid chromatographyspectrometry,。是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的,。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,，小顆粒具有高柱效，但會(huì)引起高阻力,，需用高壓輸送流動(dòng)相,，故又稱高壓液相色譜。又因分析速度快而稱為高速液相色譜,。
高效液相色譜是應(yīng)用最多的色譜分析方法,，高效液相色譜系統(tǒng)由流動(dòng)相儲(chǔ)液體瓶、輸液泵,、進(jìn)樣器,、色譜柱、檢測(cè)器和記錄器組成,，其整體組成類似于氣相色譜,，但是針對(duì)其流動(dòng)相為液體的特點(diǎn)作出很多調(diào)整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn),；進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利切換嚴(yán)密,；由于液體流動(dòng)相粘度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體，為了減低柱壓高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,，長度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱,。HPLC應(yīng)用非常廣泛，幾乎遍及定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域,。
使用高效液相色譜時(shí),，液體待檢測(cè)物被注入色譜柱，通過壓力在固定相中移動(dòng),，由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,，不同的物質(zhì)順序離開色譜柱，通過檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào)，最后通過分析比對(duì)這些信號(hào)來判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì),。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,，廣泛的應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別,，它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵,、高靈敏度檢測(cè)器和高效微粒固定相，適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā),、分子量大,、不同極性的有機(jī)化合物。