高效液相色譜柱分離效能高,??蛇x擇固定相和流動相以達到*分離效果,比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍,。
![高效液相色譜柱](https://img65.chem17.com/9/20200417/637227198739950876267.png)
高效液相色譜柱的系統(tǒng)由儲液器,、泵,、進樣器、色譜柱,、檢測器,、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),,樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運動時,, 經(jīng)過反復多次的吸附- 解吸的分配過程,,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,, 通過檢測器時,,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來,。
高效液相色譜柱需要怎么清洗,?
一般反相色譜,經(jīng)常會用到緩沖鹽,。而百鹽對于色譜柱傷害比較大,。如果鹽堵在色譜柱里面那柱子就廢了。所以需要把它沖掉,。*是每次都沖掉,。
如果你的柱子流動相里面沒有鹽,那就沒必要沖洗了,。
沖洗方法:反相柱子*保存度在純甲醇或者純乙腈里面,,但是鹽不溶于純有機相。所以中間過渡甲醇水或者乙腈水,。
究竟用什么,,要看你的流動相。
比如,,我用的是磷酸鹽緩沖液-乙腈(70:30)的流動相,,那么沖洗的時候*選用10%-15%乙腈水,沖洗1.0ml/min,,至少30min,,*40min。
如果第二天接著使用的話可以不*純甲回醇或者純乙腈封存了,。如果第二天不用,,*用純的有機相封上柱子,同樣是1.0ml/min流速沖洗30min,。
另,,也不是說不清洗就會壞,。我們研發(fā)有的時候為了趕項目,來不及沖洗色譜柱,。柱子不會怎么樣,。就是壽命會短一點而已。