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液相色譜柱的分離效果取決于色譜柱的制備和操作條件

時(shí)間:2019-9-23 閱讀:1859
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  色譜柱由柱管、壓帽,、卡套(密封環(huán)),、篩板(濾片)、接頭,、螺絲等組成,。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70 kg/cm2 時(shí),,也可采用厚壁玻璃或石英管,,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,,減小管壁效應(yīng),,不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過(guò)拋光,。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度,其效果與拋光相同,。還有使用熔融硅或玻璃襯里的,,用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,,是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金,,孔徑0.2~20μm(5~10&μm),取決于填料粒度,,目的是防止填料漏出,。
 
  色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類。多為金屬或玻璃制作,。有直管形,、盤管形、U形管等形狀,。液相色譜通常均采用填充柱,。
 
  液相色譜柱的分離效果取決于色譜柱的制備和操作條件:
 
  色譜是一種分離分析手段,分離是核心,,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟,。對(duì)色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,,分析速度快等,。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁,、有機(jī)聚合物微球(包括離子交換樹脂),、多孔碳等,其粒度一般為3,5,7,10μm等,,柱效理論值可達(dá)5~16萬(wàn)/米,。對(duì)于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效;對(duì)于同系物分析,,只要500即可,;對(duì)于較難分離物質(zhì)對(duì)則可采用高達(dá)2萬(wàn)的柱子,因此一般10~30cm左右的柱長(zhǎng)就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要,。
 
  柱效受柱內(nèi)外因素影響,,為使色譜柱達(dá)到*效率,除柱外死體積要小外,,還要有合理的柱結(jié)構(gòu)(盡可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術(shù),。即使的裝填技術(shù),在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的,,靠近管壁的部位比較疏松,,易產(chǎn)生溝流,流速較快,,影響沖洗劑的流形,,使譜帶加寬,這就是管壁效應(yīng),。這種管壁區(qū)大約是從管壁向內(nèi)算起30倍粒徑的厚度,。在一般的液相色譜系統(tǒng)中,柱外效應(yīng)對(duì)柱效的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于管壁效應(yīng),。
 

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