液相色譜柱的基本結(jié)構(gòu)；
 

　　液相色譜柱由柱管,、壓帽,、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片),、接頭,、螺絲(封頭)與柱填料等組成。
 

　　柱管：多用不銹鋼制成,，若果使用時(shí)柱壓不高于70 kg/cm2時(shí),，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度,。用于柱填料的裝填,。
 

　　壓帽：即色譜柱兩端套合于柱管端外壁的塑性圓柱帽，中部有小孔,，多為聚四氟乙烯制成,，用于固定篩板。
 

　　密封環(huán)：位于接頭螺旋環(huán)內(nèi)壁的彈性環(huán),，多為聚四氟乙烯制成,，用于色譜柱兩端壓帽與柱外壁的密封。
 

　　色譜柱使用前注意事項(xiàng),；
 

　　色譜柱在使用前,，hao進(jìn)行柱的性能測(cè)試，并將結(jié)果保存起來,，作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考,。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測(cè)試所使用的條件是jia條件)，只有這樣,，測(cè)得的結(jié)果才有可比性,。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相,、柱溫等條件的差異而有所不同,。
 

　　液相色譜儀維護(hù)保養(yǎng)；
 

　　1,、純度 流動(dòng)相必須用HPLC級(jí)的試劑，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45um或更細(xì)的膜過濾),。溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累,，會(huì)影響色譜柱的使用壽命。
 

　　2、溶解度 樣品的溶解度要適宜如果溶解度,，如果溶解度欠佳樣品會(huì)在柱頭沉淀,，不但影響純化分離，還會(huì)縮短柱子的使用壽命,。
 

　　3,、粘度要低(應(yīng)<2cp) 高粘度溶劑會(huì)影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì),，降低柱效,，還會(huì)使柱壓降增加，使分離時(shí)間延長(zhǎng),。選擇沸點(diǎn)在100℃以下的流動(dòng)相,。
 

　　4、樣品易于回收,。應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑,。
 

　　5、流動(dòng)相 PH 采用反相色譜法分離弱酸(3≤pKa≤7)或弱堿(7≤pKa≤8)樣品時(shí),，通過調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值,，以抑制樣品組分的解離，增加組分在固定相上的保留,，并改善峰形的技術(shù)稱為反相離子抑制技術(shù),。對(duì)于弱酸，流動(dòng)相的pH值越小,，組分的k值越大,，當(dāng)pH值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于弱酸的pKa值時(shí)，弱酸主要以分子形式存在;對(duì)弱堿,，情況相反,。分析弱酸樣品時(shí)，通常在流動(dòng)相中加入少量弱酸,，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%醋酸溶液;分析弱堿樣品時(shí),，通常在流動(dòng)相中加入少量弱堿，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和30mmol/L三乙胺溶液,。