液相色譜柱保護(hù)柱分類及選擇:
從材質(zhì)上分:不銹鋼材質(zhì)和PEEK(聚醚醚酮)材質(zhì)
PEEK 材質(zhì)優(yōu)缺點(diǎn)--樣品對(duì)金屬離子比較敏感時(shí),,選擇PEEK材質(zhì)比較合適,比如某些蛋白分析會(huì)用到PEEK材質(zhì)的分析柱,,主要就是考慮到這方面的因素;
不銹鋼材質(zhì)優(yōu)缺點(diǎn)--大部分小分子化合物的分析,,選擇不銹鋼材質(zhì)保護(hù)柱居多,特別是當(dāng)流動(dòng)相體系使用到si氫呋nan(THF)或DMSO等一些溶解性較強(qiáng)的溶劑時(shí),,必須選擇不銹鋼材質(zhì),,甚至對(duì)于HPLC系統(tǒng)的管路也需要替換成不銹鋼材質(zhì),因THF對(duì)于PEEK管路有相當(dāng)強(qiáng)的腐蝕作用,。
從結(jié)構(gòu)上分:卡套式(柱芯+柱套)和直接填裝短柱
直接填裝短柱優(yōu)缺點(diǎn)--這種結(jié)構(gòu)的保護(hù)柱實(shí)質(zhì)就是短的色譜柱,,一般填裝的填料跟分析柱填料*一樣。生物樣品分析中,,用這種類型保護(hù)柱居多,,除可過濾一些不溶顆粒外,還可除去一些在分析柱上易吸附的雜質(zhì),。缺點(diǎn)是,,一次性使用,污染嚴(yán)重時(shí),,只能報(bào)廢,。
卡套式保護(hù)柱優(yōu)缺點(diǎn)--卡套式保護(hù)柱的柱套可反復(fù)使用,柱芯污染后可替換,,廠家會(huì)提供配套的保護(hù)柱芯,,但購(gòu)買時(shí)需要注意,柱芯中有與分析柱匹配的填料,,需要確認(rèn)柱芯中的填料類型再購(gòu)買,。同時(shí),柱芯和柱套需是來源于同一廠家的同一規(guī)格,否則,,會(huì)存在匹配上的差異,,導(dǎo)致峰型異常或者漏液,。
從連接方式上分:獨(dú)立式和直連式
獨(dú)立式保護(hù)柱優(yōu)缺點(diǎn)--保護(hù)柱和分析柱之間用一段管路連接,,不用擔(dān)心與分析柱在連接上的匹配問題。但使用管路連接時(shí),,連接不當(dāng)容易產(chǎn)生死體積,。
直連式保護(hù)柱優(yōu)缺點(diǎn)--保護(hù)柱接口帶螺紋,可直接與分析柱連接,,死體積小,,UPLC分析時(shí)建議選擇直連式保護(hù)柱;缺點(diǎn):購(gòu)買時(shí)需保證接口與分析柱匹配。
液相色譜柱保護(hù)柱選擇考慮以下幾方面因素:
1. 除非特殊情況,,一般選擇填料基質(zhì)與分析柱基質(zhì)*相同的保護(hù)柱,。
2. 選擇保護(hù)柱尺寸可按柱體積計(jì)算,保護(hù)柱體積按分析柱體積的5%~10%即可;如4.6*250mm的分析柱體積約為4mL,,保護(hù)柱體積可選擇在0.2~0.4mL之間為宜,。同時(shí),保護(hù)柱內(nèi)徑應(yīng)與分析柱內(nèi)徑相同或相當(dāng),。