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D3520大孔非極性吸附樹脂脫鹽工藝;玉米黃粉和花生粕別離是玉米提取淀粉和花生榨油后的首要副產(chǎn)品,蛋白質(zhì)含量都很豐富,、價格低廉,但前者加工功能差,后者的加工功能也不能*滿意食物加工的需求,。研討表明,蛋白質(zhì)經(jīng)酶解后不只能夠改善其加工功能,還能夠得到具有多種生理活性的肽,。目前,已有很多關(guān)于這玉米蛋白和花生蛋白酶解改性的研討報導(dǎo),但將兩者復(fù)配后酶法制備活性肽的研討尚未見報導(dǎo)。本文以玉米黃粉和花生粗蛋白為質(zhì)料,經(jīng)提取后復(fù)配,研討了雙酶分步水解復(fù)合蛋白的工藝,;歸納比較了三種脫鹽辦法對復(fù)合蛋白酶解液的脫鹽作用,;選用層析柱對酶解產(chǎn)品進(jìn)行了初步別離,并研討了各組分的ACE按捺活性;對酶解產(chǎn)品進(jìn)行超濾別離,并研討了各組分的抗氧化活性,;探討了酶解產(chǎn)品的加工功能,。擬為玉米花生復(fù)合蛋白制備多功能的活性肽和完成其工業(yè)化供給理論依據(jù)和技能根底。研討內(nèi)容和成果如下:1玉米花生蛋白的提取及復(fù)配的研討選用醇提酸沉法從玉米黃粉中提取玉米蛋白,產(chǎn)品蛋白含量90.20±0.47%,粗脂肪含量為1.82±0.11%,水分含量為5.92±0.21%,灰分含量為4.64±0.10%,。選用超聲微波協(xié)同法提取花生蛋白,其工藝為:微波功率72W,、pH值9.73、料液比1:28,、提取時刻500s,、酸沉pH值4.5、提取2次,其蛋白質(zhì)提取率為88.37±0.27%,產(chǎn)品蛋白含量為88.95±0.39%,粗脂肪含量為1.47±0.11%,水分含量為5.86±0.21%,灰分含量為4.75±0.10%,。將玉米濃縮蛋白與花生濃縮蛋白按不同份額進(jìn)行復(fù)配,剖析復(fù)合蛋白氨基酸組成,成果表明:玉米濃縮蛋白與花生濃縮蛋白按3:1復(fù)配時其疏水性氨基酸含量高,是制備生理活性肽的抱負(fù)質(zhì)料,。2復(fù)合蛋白雙酶分步水解工藝的研討選用堿性蛋白酶和復(fù)合風(fēng)味蛋白酶分步水解復(fù)合蛋白并進(jìn)行工藝優(yōu)化,探討了酶解對復(fù)合蛋白氨基酸組成的影響。成果顯現(xiàn),雙酶分步水解復(fù)合蛋白工藝為:步,以水解度為目標(biāo),蛋白底物濃度5%,、堿性蛋白酶增加量為6300U/g,、溫度55℃、pH值為9.5,、酶解210min,滅酶,此條件下水解度為27.63±0.07%,。第二步,以游離氨基氮為目標(biāo),取10mL上述酶解液,復(fù)合風(fēng)味酶增加量900U/g、溫度50℃,、pH7.0,、酶解3小時,滅酶,此條件下其游離氨基氮含量達(dá)1.25±0.09mg/mL,。酶解反響條件溫文,酶解前后復(fù)合蛋白氨基酸組成無顯著變化。3復(fù)合蛋白酶解產(chǎn)品脫鹽辦法的研討別離選用MWCO100透析袋,、D3520大孔非極性吸附樹脂脫鹽工藝?,;001×7與201×7離子交換樹脂和D3520大孔吸附樹脂對復(fù)合蛋白酶解液進(jìn)行脫鹽,并對其脫鹽作用進(jìn)行比較。成果表明:透析法的脫鹽率和氮回收率都較低,;離子交換樹脂法的脫鹽率和氮回收都較高,;D3520大孔吸附樹脂的脫鹽作用好,流速為10倍柱體積·h-1,其脫鹽率達(dá)88.42±0.91%,氮回收率達(dá)89.06±0.87%。復(fù)合蛋白酶解產(chǎn)品經(jīng)D3520大孔吸附樹脂脫鹽后疏水性氨基酸得到了有用富集,其含量由50.8%上升至66.0%,ACE按捺率顯著進(jìn)步,其IC50從0.309±0.03mg/mL下降到0.257±0.02mg/mL4復(fù)合蛋白酶解產(chǎn)品分子量及其ACE按捺活性的研討選用凝膠色譜法探討了玉米花生復(fù)合蛋白酶解產(chǎn)品的分子量,并選用Sephadex G-25對其進(jìn)行了別離純化,比較了各組分的ACE按捺活性,。成果表明:玉米花生復(fù)合蛋白酶解產(chǎn)品的數(shù)均分子量Mn為1.12×103,重均分子量Mw為2.96x103,散布寬為2.65,。玉米花生復(fù)合蛋白酶解產(chǎn)品經(jīng)SephadexG-25柱層析別離出4個峰,搜集這4個組分,其間組分Ⅲ的ACE按捺活性高。5復(fù)合蛋白酶解產(chǎn)品抗氧化才能的研討將復(fù)合蛋白酶解液經(jīng)超濾膜別離得到兩個組分:組分Ⅰ(3-6kD的酶解產(chǎn)品),、組分Ⅱ(<3kD的酶解產(chǎn)品),研討了復(fù)合肽,、組分Ⅰ和組分Ⅱ鏟除OH、O2-·,、DPPH及ABTS+的才能,。成果表明:復(fù)合肽及其各組分均具有抗氧化活性,且其抗氧化活性與濃度之間存在量效聯(lián)系,但三者抗氧化才能均弱于Vc。組分Ⅰ鏟除OH,、O2-·,、DPPH的才能強(qiáng),復(fù)合肽次之,而組分Ⅱ低;復(fù)合肽鏟除ABTS+才能顯著強(qiáng)于組分Ⅰ和組分Ⅱ,。6復(fù)合蛋白酶解產(chǎn)品加工功能的研討研討了復(fù)合蛋白及其酶解產(chǎn)品的溶解性,、黏度、吸油性,、起泡性和泡沫穩(wěn)定性,、乳化性等加工功能,探討了酶解改性對復(fù)合蛋白加工功能的影響。成果表明:復(fù)合蛋白難溶于水,且受pH值影響較大,其NSI在等電點(diǎn)鄰近pH5-7較低,違背此規(guī)模, NSI值上升,;而復(fù)合肽易溶于水,其NSI在pH2-9規(guī)模內(nèi)沒有差異(P>0.05),維持在90%以上,。復(fù)合蛋白的黏度與其溶解性有關(guān),濃度超越10%,部分蛋白沒有溶解,使黏度敏捷上升;而復(fù)合肽易溶于水,具有高濃度低粘度的特色,。復(fù)合肽的吸油性顯著高于復(fù)合蛋白,兩者的吸油性均跟著溫度升高而下降,;復(fù)合肽的起泡性顯著優(yōu)于復(fù)合蛋白,但兩者泡沫穩(wěn)定性都較差;低溫時復(fù)合蛋白具有良好的乳化性,但受pH影響大,而復(fù)合肽的乳化性在整個試驗(yàn)規(guī)模內(nèi)無顯著變化,維持在40%左右,高溫對兩者乳化穩(wěn)定性均發(fā)生不利影響,??倸w,酶解顯著地改善了復(fù)合蛋白的加工功能,使其更利于食物加工。
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