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小鼠神經(jīng)干細(xì)胞C17.2科研說(shuō)明書(shū)
生長(zhǎng)特性：貼壁,懸浮,半懸浮半貼壁
培養(yǎng)條件:640+10%FBS+1%雙抗

溫度:37℃
空氣條件:5% CO2,，,95% AIR
傳代方法:1:2傳代,，2~3天換液
凍存條件:90%FBS+10%DMSO

運(yùn)輸和保存

可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式：

（1）干冰運(yùn)輸,，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇,；

（2）存活細(xì)胞,，收到后應(yīng)繼續(xù)生長(zhǎng),，傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存,。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟,。

細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)步驟

收到常溫細(xì)胞后處理方法

1. 收到細(xì)胞后首先觀(guān)察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
２. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)２－４小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)．

３. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，貼壁特性(貼壁/懸?。?xì)胞形態(tài),，所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基．血清比例,，所需細(xì)胞因子，傳代比例,，換液頻率等．

４. 靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,，拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,，記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)．

５. 貼壁細(xì)：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)８０％,，可正常傳代，若未超過(guò)８０％,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留５ＭＬ左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)８０％左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松．

６. 懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至５０ＭＬ無(wú)菌離心管內(nèi),，１２００rpm離心５min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入５ml培養(yǎng)基吹打．重懸．鏡檢時(shí),，基細(xì)胞密度超過(guò)８０％,，可將細(xì)胞懸液分至２個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至５ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)８０％,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)８０％左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作．

方     式： 詳詢(xún)經(jīng)理

小鼠神經(jīng)干細(xì)胞C17.2科研說(shuō)明書(shū)

內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜,，隔天再取出觀(guān)察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng),；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次,。

4. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng),。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶(hù)自備的培養(yǎng)基混合,，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件;建議直接購(gòu)買(mǎi)提供的*培養(yǎng)基,。
5. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通交流,。
培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,，不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷,、治療。
2）公司細(xì)胞資源中心承諾盡zui大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新,。但限于我們的技術(shù)條件,，中心不保證其準(zhǔn)確性。
3）從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),，僅供參考,。
 

 
注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系,。
2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,，并請(qǐng)注意防護(hù),，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。