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軟瓊脂(soft agar)實(shí)驗(yàn)一般用來檢測(cè)細(xì)胞的集落形成能力。現(xiàn)在這種方法越來越多的用于分離癌細(xì)胞，也可以用來確認(rèn)癌細(xì)胞是否具有癌化特性,，為進(jìn)一步做腫瘤小鼠移植模型奠定理論基礎(chǔ)。該方法看似簡(jiǎn)單,，但如果細(xì)節(jié)掌握不好,，往往導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或數(shù)據(jù)缺乏說服力。如果你曾經(jīng)在這個(gè)實(shí)驗(yàn)上栽了跟頭,，請(qǐng)不妨在如下幾個(gè)方面進(jìn)行嘗試：

1.要確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中所使用的瓊脂處于*液體狀態(tài)（>80℃）,，尤其是在做基底時(shí),，如果瓊脂凝固過快會(huì)導(dǎo)致基底不均一；

2. 做瓊脂基底是應(yīng)避免產(chǎn)生小氣泡,，一旦有小氣泡產(chǎn)生,，應(yīng)該立即將氣泡趕走；

3. 應(yīng)使用2倍濃度的培養(yǎng)基,，并加入20%FBS 和2%的P/S,；

4. 在制備上層時(shí)，混合液體需要有順序,，一般為在同一個(gè)移液管中先吸取液態(tài)瓊脂,，再吸取同體積的2倍濃度的培養(yǎng)基，后在吸取2倍體積的細(xì)胞懸液,，這樣既可以保證瓊脂不立即固化,，又可以有效避免細(xì)胞因溫度過高而燙死；

5. 因?yàn)樵搶?shí)驗(yàn)周期較長(zhǎng),，為避免過度蒸發(fā)而導(dǎo)致瓊脂裂解,，需要保證小環(huán)境持久濕潤(rùn)，一般可在六孔板或培養(yǎng)皿下面墊上三到四層濕潤(rùn)的薄紙,。