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如何進(jìn)行培養(yǎng)基滅菌

閱讀:4504        發(fā)布時間:2017-7-14

  在發(fā)酵過程中,,培養(yǎng)基滅菌主要有以下幾個原因:如不滅菌,,會使生物反應(yīng)
的基質(zhì)或產(chǎn)物,,因雜菌的消耗而損失,,造成生產(chǎn)能力的下降;雜菌也會產(chǎn)生代謝
產(chǎn)物,,這就使產(chǎn)物的提取更加困難,,造成得率降低,,產(chǎn)品質(zhì)量下降;雜菌大量繁
殖后,會改變反應(yīng)液的 pH 值,,使反應(yīng)異常;有些雜菌會分解產(chǎn)物,,使生產(chǎn)失敗;
如果發(fā)生噬菌體污染,生產(chǎn)菌細(xì)胞將被裂解,,使生產(chǎn)失敗,。怎樣進(jìn)行培養(yǎng)基滅菌?
 濕熱滅菌
 培養(yǎng)基滅菌大多數(shù)用濕熱滅菌。衡量熱滅菌的指標(biāo)很多,,zui常用的是“熱死
時間”,,即在限定的溫度下殺死原有微生物中一定比例所需的持續(xù)時間。影響熱
滅菌的溫度和時間的因素很多,,包括:微生物種類,、性質(zhì)、濃度和培養(yǎng)基的性質(zhì),、
濃度等,。
 (1)連續(xù)滅菌
 連續(xù)滅菌也叫連消,其溫度一般以 126~132 ℃為宜,,總蒸汽壓力要求達(dá)到
0.044~0.049 MPa 以上,。培養(yǎng)基采用連續(xù)滅菌時,需在培養(yǎng)基進(jìn)入發(fā)酵罐前,,
直接用蒸汽進(jìn)行空罐滅菌(空消),用無菌空氣保壓,,待培養(yǎng)基流入罐后,,開始冷
卻。滅菌時對培養(yǎng)基的加熱可采用各種加熱器,。培養(yǎng)基的冷卻方式有噴淋冷卻式,、
真空冷卻式、薄板換熱器式幾種方式,,其過程均包括加熱,、維持和冷卻。
 (2)間歇滅菌
 間歇滅菌即實消,,是在每批培養(yǎng)基全部流入發(fā)酵罐后,,就在罐內(nèi)通入蒸汽加
熱至滅菌溫度,維持一定時間,再冷卻到接種溫度,。實罐滅菌時,,發(fā)酵罐與培養(yǎng)
基一起滅菌。
 其他滅菌設(shè)備一般采用蒸汽滅菌,,如設(shè)備十分耐壓,,則可采用較高的溫度,
但必須注意設(shè)備內(nèi)部的凹處及露出的小配管等蒸汽不能到達(dá)的部位,。
 高壓蒸汽滅菌
 高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養(yǎng)基,、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基在制
備過程中混入各種雜菌,,分裝后應(yīng)立即滅菌,,至少應(yīng)在 24h 內(nèi)完成滅菌工作。滅
菌時一般是在 0.105MPa 壓力下,,溫度 121℃時,,滅菌 15~30min 即可。消毒時間
不宜過長,,也不能超過規(guī)定的壓力范圍,,否則有機(jī)物質(zhì)特別是維生素類物質(zhì)就會
在高溫下分解,失去營養(yǎng)作用,,也會使培養(yǎng)基變質(zhì),、變色,甚至難以凝固

 

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