大腸菌群和大腸桿菌菌落計(jì)數(shù)方法
1.平板計(jì)數(shù)法
通常使用的培養(yǎng)基為紫紅膽鹽乳糖瓊脂。準(zhǔn)備兩套平板,,每個平板各加入稀釋范圍內(nèi)的樣品液1ml,,另加15ml熔化并冷卻至45℃的紫紅膽鹽乳糖瓊脂充分混勻。再覆蓋5ml瓊脂培養(yǎng)基,,凝固后將平板翻轉(zhuǎn),,置于35℃培養(yǎng)24h,進(jìn)行大腸菌群計(jì)數(shù)。培養(yǎng)后的大腸菌群為深紅色菌落,。通常典塑大腸菌群的菌落直徑為0.5mm或稍大,,緊貼菌落周圍有膽鹽沉淀。當(dāng)幾個菌落長在一起時菌落可能變小,。如果食品中含有碳水化合物而不含乳糖,,那么當(dāng)?shù)拖♂尪龋雀邼舛龋┦称芳拥脚囵B(yǎng)基中可能導(dǎo)致前文提及的異常結(jié)果。對10-2或更低稀釋度的平板,,有必要對大腸菌群的假陽性結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證,,可將菌落挑選出來,轉(zhuǎn)接到乳糖肉湯或麥康凱肉湯中在35℃培養(yǎng)后驗(yàn)證,,或用Eijk-man試驗(yàn)驗(yàn)證大腸桿菌的存在。
2.干燥復(fù)水膜計(jì)數(shù)法
干燥復(fù)水膜是一種十分有用的大腸桿菌計(jì)數(shù)膜,。用紫紅膽鹽培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,,添加5-溴-4-氯-吲哚-β-葡萄糖苷酸以檢測葡萄糖醛酸的活性。大腸桿菌在平板上為藍(lán)色菌落并伴有氣泡產(chǎn)生,。該產(chǎn)品便于操作和讀數(shù),,巳被作為AOAC確認(rèn)為*方法。
3.濾膜法
將濾膜(MF)和改進(jìn)的選擇性培養(yǎng)基結(jié)合使用,,可檢測某些樣品中的大腸菌群和大腸桿菌,。該方法對飲用水的檢測十分有用。