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什么限制了您的文章發(fā)表,?組織圖片自發(fā)熒光太亮

時間:2023/12/13閱讀:417
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在免疫組化檢測過程中,,許多樣本組織會產(chǎn)生可通過各種波長濾光片的組織內(nèi)源性自發(fā)熒光,,干擾抗體標記的目的蛋白熒光的觀察,,甚至導(dǎo)致實驗失敗,。為了解決免疫組化實驗中的自發(fā)熒光,VectorLabs公司專門開發(fā)了一款Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit試劑盒,,該產(chǎn)品旨在去除組織切片中由于醛固定,、紅細胞以及膠原蛋白/彈性蛋白結(jié)構(gòu)造成的自發(fā)熒光。該試劑使用方便,,無需稀釋操作,,為即用型試劑。 該試劑盒中含有防自發(fā)熒光效果excellent的VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 封片劑(含或不含DAPI兩種),??蛻魺o需單獨購買封片劑,經(jīng)濟,、實用,。

注意:該試劑盒對脂褐素造成的組織自發(fā)熒光無效,。


● 試劑盒組成: 

a. Vector®TrueVIEW™ Reagent A 5ml b. Vector®TrueVIEW™ Reagent B 5ml c. Vector®TrueVIEW™ Reagent C 5ml d. VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 2ml e. VECTASHIELD Vibrance Antifade  Mounting Media with DAPI 2ml

其中,貨號SP-8400包含a,b,c,d四個組分,;貨號SP-8500包含a,b,c,e四個組分


● 產(chǎn)品使用方法:

揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵 將ReagentA,、B、C以1:1:1的比例混合,。(注意混合順序,,先將A和B以1:1比例混合10s,再加入C,混勻10s) 
揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵 將混好后的TrueView試劑滴加到組織樣本切片上,,將樣本完-全覆蓋,,孵育2-5min 
揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵 使用PBS緩沖液洗片5次,除去多余緩沖液,,VECTASHIELD Vibrance Media封片后觀察 

● 產(chǎn)品特征 

A 顯著降低背景染色并保留特異性抗原染色,; B 提高信噪比; C 產(chǎn)品穩(wěn)定,,儲存在滴瓶中,,使用方便; D 操作簡單,,快速,;整個染色過程僅需2-5min; E 為使用者提供清晰,、明確,、真實的染色結(jié)果; F 適用于多種熒光染料的自發(fā)熒光去除,,包括Alexa488,,Alexa 594,DyLight 488,,DyLight 594,,F(xiàn)ITC,Cyanine 5和GFP,;

G SP-8500試劑盒中的封片劑中DAPI濃度較高,,可對細胞核進行清晰的染色。


● 產(chǎn)品對自發(fā)熒光淬滅效果:

◆ 右圖為經(jīng)Vector®TrueVIEW™kit處理后,,人腎臟組織切片中自發(fā)熒光淬滅的百分比與處理時間之間的關(guān)系,。 ◆ Note:2分鐘內(nèi)即可達到最大淬滅效果。 


● 產(chǎn)品應(yīng)用舉例:  

> 案例一

未經(jīng)任何處理使用Vector®TrueVIEW™處理
揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵
◆ 上圖為人脾臟組織染色結(jié)果:使用VectaFluor TM Duet試劑盒(DK-8818)檢測的mouse anti-CD20(red)和rabbit anti-Ki67(green)對人脾組織切片的染色,。 ◆ 左圖為未經(jīng)任何處理的染色結(jié)果,, ◆ 右圖為使用TrueVIEW™Autofluorescence Quenching試劑盒染色結(jié)果。于未經(jīng)處理的染色結(jié)果相比,經(jīng)TrueVIEW™Autofluorescence Quenching試劑盒處理后,,自發(fā)熒光顯著減少,。


> 案例二

揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵 ◆ A-D圖為人腎臟切片(石蠟切片)染色結(jié)果,實驗中使用anti-AE1 /AE3抗體對角蛋白進行染色(綠色),?!?nbsp;A圖未經(jīng)處理, ◆ B-D圖經(jīng)TrueVIEW™Quencher Kit處理,。自發(fā)熒光明顯減弱,。延長曝光時間,陽性信號強度也隨之增強,。
揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵 揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵


> 案例三

未經(jīng)任何處理使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI處理

揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵

揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵
◆ 上圖為人胰腺組織染色結(jié)果:綠色為insulin的染色,。
◆ 左圖為未經(jīng)任何處理的染色結(jié)果,
◆ 右圖為使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI(SP-8500)試劑盒染色結(jié)果,。與未經(jīng)處理的染色結(jié)果相比,經(jīng)該試劑盒處理后,,自發(fā)熒光顯著減少,,核染色顯著增強。


> 案例四

未經(jīng)處理(內(nèi)源性自發(fā)熒光)  經(jīng)TrueVIEW™Quencher Kit處理
揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵
Company ACompany BCompany C
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Copper Sulfate SolutionSodium BorohydrideSudan Black B
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● 產(chǎn)品訂購信息 Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit

產(chǎn)品貨號規(guī)格染色切片數(shù)
Vector® True VIEW™
Autofluorescence Quenching Kit
SP-840015ml100-150
Vector® True VIEW™
Autofluorescence Quenching Kit
SP-850015ml100-150
VECTOR TrueVIEW  
Autofluorescence Quenching Kit (3ml)
SP-84033ml~30
VECTASHIELD® HardSet™
Antifade Mounting Medium
H-140010ml100-150
VECTASHIELD® HardSet™
with DPI Antifade Mounting Medium
H-150010ml100-150




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