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標準化生物實驗室的技術規(guī)范準則之儀器操作

閱讀:2560      發(fā)布時間:2020-8-7
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茂默科學以客戶為本,、合作共贏的理念,,致力于幫忙客戶提供整體實驗方案。力求解決行業(yè)內(nèi)客戶對科學儀器選型難,、維護難的處境,。通過不斷優(yōu)化公司運作和提升服務質(zhì)量,目前已贏得業(yè)內(nèi)人士和廣大客戶廣泛認可,,擁有廣泛而穩(wěn)固的合作伙伴和客戶群體?,F(xiàn)介紹標準化生物實驗室的技術規(guī)范準則之實驗室儀器與器具操作。

生物實驗室傷害以及與工作有關的感染主要是由于人為失誤,、不規(guī)范的實驗技術操作以及儀器使用不當造成的,。以下簡要介紹生物實驗室規(guī)范操作技術和方法。

1,、移液管和移液器

 

  使用移液管和移液器時應注意:①使用移液管時應使用吸球或定量移液器,;②移液管應帶有棉塞以減少移液器具的污染,;③為減少氣溶膠的產(chǎn)生,應避免向含有感染性物質(zhì)的溶液中吹入氣體,,避免將移液管中的液體用力吹出,,刻度移液管不需要排出后一滴液體;④污染的移液管需*浸入盛有消毒液的防碎容器中消毒至規(guī)定時間,。盛放廢棄移液管的容器應放在生物安全柜內(nèi),;⑤打開封口瓶子時應使用移液管的工具,避免使用皮下注射針頭和注射器,;⑥為避免感染性物質(zhì)從移液管中滴出而擴散,,在工作臺面應放置浸有消毒液的布或吸有消毒液的紙,使用后按感染性廢棄物處理,;⑦在每階段工作結(jié)束后,,必須采用適當?shù)南緞┣宄ぷ鲄^(qū)的污染。

 

  2,、微生物接種環(huán)

 

  要求直徑2~3mm并*封閉,,柄的長度小于6cm以減小抖動。使用封閉式微型電加熱器消毒接種環(huán),,或使用一次性接種環(huán),。

 

  3、生物安全柜

 

  使用生物柜應注意:①須具有生物安全柜書面規(guī)章,、使用操作說明或安全手冊,;②生物安全柜應在運行正常時使用,所有工作必須在工作臺面的中后部進行,;③安全柜內(nèi)應盡量少放置器材或標本,,避免任何物品阻擋安全柜內(nèi)前后的空氣格柵,避免影響安全柜后部壓力排風系統(tǒng)的氣流循環(huán),;④盡量減少操作者身后的人員活動,,避免操作者手臂在安全柜里反復移出和伸進,以防干擾安全柜氣流,;⑤在安全柜內(nèi)的工作開始前和結(jié)束后,,安全柜的風機應至少運行5分鐘;⑥實驗完成后以及每天工作結(jié)束時,,應使用適當?shù)南緞ι锇踩竦谋砻孢M行擦拭,;⑦在生物安全柜內(nèi)操作時,不得進行文字工作,。

 

  4,、離心機、勻漿器,、組織研磨器,、搖床,、攪拌器和超聲處理器

 

  避免氣溶膠及標本的溢出,保證儀器正常運行是使用這些儀器的基本原則,。

 

 ?。?)離心機:離心機運行操作、離心管標本裝量與配平,、離心機維護等內(nèi)容見第二章常用儀器設備安全使用,。操作具有生物危害的樣本時,需要特別注意:①離心桶的裝載,、平衡,、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進行。操作危險度Ⅲ級和Ⅳ級的微生物,,必須使用可封口的離心桶(安全杯),。②應每天檢查離心機內(nèi)轉(zhuǎn)子部位的腔壁是否被污染,以評估離心操作規(guī)范,。每次使用后,要清除離心桶,、轉(zhuǎn)子和離心機腔的污染,。

 

  (2)勻漿器,、組織研磨器,、搖床、攪拌器和超聲處理器:使用以上儀器時應注意:①使用專門提供實驗室用的以上儀器,。確認儀器運轉(zhuǎn)正常,。②由于玻璃可能破碎而釋放感染性物質(zhì)并傷害操作者,建議使用塑料容器,,如聚四氟乙烯(PTFE)容器,。③用勻漿器、搖床和超聲處理器時,,應該用結(jié)實透明的塑料箱覆蓋設備,,并在用完后消毒??赡艿脑?,這些儀器可在生物安全柜內(nèi)覆蓋塑料罩進行操作。④使用玻璃研磨器時要求戴手套并用吸收性材料包住,。建議使用塑料研磨器,。⑤操作結(jié)束后,應在生物安全柜內(nèi)打開容器,。⑥超聲處理器操作人員應采取聽力保護措施,。

 

  5,、冰箱

 

  實驗室冰箱應明確其規(guī)定用途。使用中應注意:①冰箱,、低溫冰箱和干冰柜應當定期除霜和清潔,,應清理出所有在儲存過程中破碎的安瓿和試管等物品。清理時應戴厚橡膠手套并進行面部防護,,清理后要對內(nèi)表面進行消毒,。②儲存在冰箱內(nèi)的所有容器應當清楚地標明內(nèi)裝物品的科學名稱、儲存日期和儲存者的姓名,。未標明的或廢舊物品應當高壓滅菌并丟棄,。③應當建立凍存物品清單④除非有防爆措施,否則冰箱內(nèi)不能放置易燃溶液,。冰箱門上應明確標示,。

 

  6、玻璃器皿和銳器

 

  實驗室中盡可能用塑料制品代替玻璃制品,。必須使用玻璃器皿時只能用實驗室級別的玻璃,,任何破碎或有裂痕的玻璃制品均應丟棄。實驗過程中不得將注射針作為移液管使用,,減少使用注射器和針頭,。如必須使用注射器和針頭時,采用銳器安全裝置,。嚴禁重新給用過的注射器針頭戴護套,。實驗中盡量用巴斯德塑料吸管代替玻璃吸管。

 

  7,、裝有凍干感染性物質(zhì)安瓿開啟與儲存

 

 ?。?)安瓿開啟:安瓿開啟應在生物安全柜內(nèi)進行,開啟前消毒安瓿外表面,。用砂輪在安瓿凍干物遠端中部銼一痕跡,,取酒精浸泡的棉花將安瓿包起來以保護雙手,然后手持安瓿從標記的銼痕處打開,。小心移去安瓿頂部,,如果安瓿內(nèi)裝有棉花,用消毒鑷子除去,。棄去物均按污染材料處理,。緩慢向安瓿中加入液體來重懸凍干物,避免出現(xiàn)泡沫,。

 

 ?。?)安瓿儲存:裝有感染性物品的安瓿不得浸入液氮中,以避免有裂痕或密封不嚴的安瓿在取出時破碎或爆炸。建議將感染性物品真空冷凍干燥,,儲存于-80℃冰箱或干冰中,。從冷藏處取出安瓿時,實驗室人員應當進行眼睛和手的防護,。

 

  8,、感染性物品的操作

 

  (1)血樣采集:由受過培訓的人員采集病人或動物血樣,。采集靜脈血時,,使用一次性安全真空采血管取代傳統(tǒng)的針頭和注射器。所有操作均必須戴手套,。裝有標本的試管應置于二級容器中運至實驗室,,并在實驗室內(nèi)部轉(zhuǎn)運。檢驗申請單應當分開放置在防水袋或信封內(nèi),,接收人員不應打開這些袋子,。

 

  (2)血清分離:操作人員需經(jīng)過嚴格培訓,。操作時應戴手套以及眼睛和黏膜的保護裝置,。實驗操作中避免或盡量減少氣溶膠的產(chǎn)生。血液和血清應小心吸取,,不得傾倒,。嚴禁用口吸液。帶有血凝塊等廢棄標本管,,加蓋后放于防漏容器內(nèi)高壓滅菌,。操作前應準備相應種類的消毒劑,,用于及時處理可能噴濺和溢出的標本,。

 

  (3)涂片,、蓋玻片,、組織及組織切片:用于顯微鏡觀察的血液、唾液,、尿液,、糞便、分泌物和骨髓標本在固定和染色時,,不必殺死涂片上的所有微生物和病毒,。所使用的載玻片、蓋玻片,、染色及洗液等廢棄物均應按污染物進行處理,,并經(jīng)相應消毒液浸泡或高壓滅菌后再丟棄。組織標本應用甲醛或多聚甲醛固定。應當避免冷凍切片,。如果必須進行冷凍切片,,應當使用安全罩,操作者要戴安全防護面罩,。清除污染時,,儀器溫度要求升至20℃。

 

 ?。?)朊蛋白(prion)相關組織:操作過程必須在生物安全柜中進行,,在生物安全柜的工作臺面使用一次性防護罩。實驗人員必須穿戴一次性防護,、服(隔離衣和圍裙)和手套,,病理學家應戴特制的具有鋼絲網(wǎng)的兩層橡膠手套。盡可能地使用一次性塑料器具,,使用儀器設備,,不與其他實驗室共用儀器。

 

  含有朊蛋白的組織標本暴露于96%甲酸1小時可以基本失活,。實驗廢棄物,,包括一次性手套、隔離衣和圍裙,,均應當采用多孔負荷蒸汽滅菌器在134~137℃高壓滅菌18分鐘一個循環(huán),,或高壓滅菌3分鐘六個循環(huán),然后再焚燒,。

 

  朊蛋白的感染性廢液應當用終濃度含20g/L有效氯的次氯酸鈉處理1小時,。污染的生物安全柜和其他表面可以采用含20g/L有效氯的次氯酸鈉處理1小時來清除污染。不能高壓滅菌的用具可以反復用含20g/L有效氯的次氯酸鈉潤濕超過1小時來進行清潔,,并要求用水沖洗以清除殘留的次氯酸鈉,。

 

  操作朊蛋白相關組織還應注意:①鋼絲網(wǎng)手套由于不是一次性用品,必須進行污染物的清除,。②朊蛋白對紫外線照射也具有抵抗力,。雖然甲醛不能有效降低標本中朊蛋白感染性,但安全柜仍必須用標準方法來清除污染(如甲醛蒸氣),,以滅活可能存在的其他微生物因子,。③HEPA過濾器摘除后需要在至少1000℃的溫度下焚燒。

 

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