茂默科學以客戶為本,、合作共贏的理念,致力于幫忙客戶提供整體實驗方案,。力求解決行業(yè)內(nèi)客戶對科學儀器選型難,、維護難的處境。通過不斷優(yōu)化公司運作和提升服務質(zhì)量,,目前已贏得業(yè)內(nèi)人士和廣大客戶廣泛認可,,擁有廣泛而穩(wěn)固的合作伙伴和客戶群體。現(xiàn)介紹標準化生物實驗室的技術規(guī)范準則之實驗室儀器與器具操作,。
生物實驗室傷害以及與工作有關的感染主要是由于人為失誤,、不規(guī)范的實驗技術操作以及儀器使用不當造成的。以下簡要介紹生物實驗室規(guī)范操作技術和方法,。
1,、移液管和移液器
使用移液管和移液器時應注意:①使用移液管時應使用吸球或定量移液器;②移液管應帶有棉塞以減少移液器具的污染,;③為減少氣溶膠的產(chǎn)生,,應避免向含有感染性物質(zhì)的溶液中吹入氣體,避免將移液管中的液體用力吹出,,刻度移液管不需要排出后一滴液體,;④污染的移液管需*浸入盛有消毒液的防碎容器中消毒至規(guī)定時間。盛放廢棄移液管的容器應放在生物安全柜內(nèi),;⑤打開封口瓶子時應使用移液管的工具,,避免使用皮下注射針頭和注射器;⑥為避免感染性物質(zhì)從移液管中滴出而擴散,,在工作臺面應放置浸有消毒液的布或吸有消毒液的紙,,使用后按感染性廢棄物處理;⑦在每階段工作結(jié)束后,,必須采用適當?shù)南緞┣宄ぷ鲄^(qū)的污染,。
2、微生物接種環(huán)
要求直徑2~3mm并*封閉,,柄的長度小于6cm以減小抖動,。使用封閉式微型電加熱器消毒接種環(huán),,或使用一次性接種環(huán)。
3,、生物安全柜
使用生物柜應注意:①須具有生物安全柜書面規(guī)章,、使用操作說明或安全手冊;②生物安全柜應在運行正常時使用,,所有工作必須在工作臺面的中后部進行,;③安全柜內(nèi)應盡量少放置器材或標本,避免任何物品阻擋安全柜內(nèi)前后的空氣格柵,,避免影響安全柜后部壓力排風系統(tǒng)的氣流循環(huán),;④盡量減少操作者身后的人員活動,避免操作者手臂在安全柜里反復移出和伸進,,以防干擾安全柜氣流,;⑤在安全柜內(nèi)的工作開始前和結(jié)束后,安全柜的風機應至少運行5分鐘,;⑥實驗完成后以及每天工作結(jié)束時,,應使用適當?shù)南緞ι锇踩竦谋砻孢M行擦拭;⑦在生物安全柜內(nèi)操作時,,不得進行文字工作,。
4、離心機,、勻漿器,、組織研磨器、搖床,、攪拌器和超聲處理器
避免氣溶膠及標本的溢出,,保證儀器正常運行是使用這些儀器的基本原則。
?。?)離心機:離心機運行操作,、離心管標本裝量與配平、離心機維護等內(nèi)容見第二章常用儀器設備安全使用,。操作具有生物危害的樣本時,,需要特別注意:①離心桶的裝載、平衡,、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進行,。操作危險度Ⅲ級和Ⅳ級的微生物,必須使用可封口的離心桶(安全杯),。②應每天檢查離心機內(nèi)轉(zhuǎn)子部位的腔壁是否被污染,,以評估離心操作規(guī)范。每次使用后,,要清除離心桶,、轉(zhuǎn)子和離心機腔的污染。
?。?)勻漿器,、組織研磨器、搖床,、攪拌器和超聲處理器:使用以上儀器時應注意:①使用專門提供實驗室用的以上儀器,。確認儀器運轉(zhuǎn)正常。②由于玻璃可能破碎而釋放感染性物質(zhì)并傷害操作者,,建議使用塑料容器,,如聚四氟乙烯(PTFE)容器。③用勻漿器,、搖床和超聲處理器時,,應該用結(jié)實透明的塑料箱覆蓋設備,并在用完后消毒,??赡艿脑挘@些儀器可在生物安全柜內(nèi)覆蓋塑料罩進行操作,。④使用玻璃研磨器時要求戴手套并用吸收性材料包住,。建議使用塑料研磨器。⑤操作結(jié)束后,,應在生物安全柜內(nèi)打開容器,。⑥超聲處理器操作人員應采取聽力保護措施。
5,、冰箱
實驗室冰箱應明確其規(guī)定用途,。使用中應注意:①冰箱、低溫冰箱和干冰柜應當定期除霜和清潔,,應清理出所有在儲存過程中破碎的安瓿和試管等物品,。清理時應戴厚橡膠手套并進行面部防護,清理后要對內(nèi)表面進行消毒,。②儲存在冰箱內(nèi)的所有容器應當清楚地標明內(nèi)裝物品的科學名稱,、儲存日期和儲存者的姓名。未標明的或廢舊物品應當高壓滅菌并丟棄,。③應當建立凍存物品清單④除非有防爆措施,,否則冰箱內(nèi)不能放置易燃溶液。冰箱門上應明確標示,。
6,、玻璃器皿和銳器
實驗室中盡可能用塑料制品代替玻璃制品。必須使用玻璃器皿時只能用實驗室級別的玻璃,,任何破碎或有裂痕的玻璃制品均應丟棄,。實驗過程中不得將注射針作為移液管使用,,減少使用注射器和針頭。如必須使用注射器和針頭時,,采用銳器安全裝置,。嚴禁重新給用過的注射器針頭戴護套。實驗中盡量用巴斯德塑料吸管代替玻璃吸管,。
7,、裝有凍干感染性物質(zhì)安瓿開啟與儲存
(1)安瓿開啟:安瓿開啟應在生物安全柜內(nèi)進行,,開啟前消毒安瓿外表面,。用砂輪在安瓿凍干物遠端中部銼一痕跡,取酒精浸泡的棉花將安瓿包起來以保護雙手,,然后手持安瓿從標記的銼痕處打開,。小心移去安瓿頂部,如果安瓿內(nèi)裝有棉花,,用消毒鑷子除去,。棄去物均按污染材料處理。緩慢向安瓿中加入液體來重懸凍干物,,避免出現(xiàn)泡沫,。
(2)安瓿儲存:裝有感染性物品的安瓿不得浸入液氮中,,以避免有裂痕或密封不嚴的安瓿在取出時破碎或爆炸,。建議將感染性物品真空冷凍干燥,儲存于-80℃冰箱或干冰中,。從冷藏處取出安瓿時,,實驗室人員應當進行眼睛和手的防護。
8,、感染性物品的操作
?。?)血樣采集:由受過培訓的人員采集病人或動物血樣。采集靜脈血時,,使用一次性安全真空采血管取代傳統(tǒng)的針頭和注射器,。所有操作均必須戴手套。裝有標本的試管應置于二級容器中運至實驗室,,并在實驗室內(nèi)部轉(zhuǎn)運,。檢驗申請單應當分開放置在防水袋或信封內(nèi),接收人員不應打開這些袋子,。
?。?)血清分離:操作人員需經(jīng)過嚴格培訓。操作時應戴手套以及眼睛和黏膜的保護裝置。實驗操作中避免或盡量減少氣溶膠的產(chǎn)生,。血液和血清應小心吸取,,不得傾倒。嚴禁用口吸液,。帶有血凝塊等廢棄標本管,,加蓋后放于防漏容器內(nèi)高壓滅菌。操作前應準備相應種類的消毒劑,,用于及時處理可能噴濺和溢出的標本。
?。?)涂片,、蓋玻片、組織及組織切片:用于顯微鏡觀察的血液,、唾液,、尿液、糞便,、分泌物和骨髓標本在固定和染色時,,不必殺死涂片上的所有微生物和病毒。所使用的載玻片,、蓋玻片,、染色及洗液等廢棄物均應按污染物進行處理,并經(jīng)相應消毒液浸泡或高壓滅菌后再丟棄,。組織標本應用甲醛或多聚甲醛固定,。應當避免冷凍切片。如果必須進行冷凍切片,,應當使用安全罩,,操作者要戴安全防護面罩。清除污染時,,儀器溫度要求升至20℃,。
(4)朊蛋白(prion)相關組織:操作過程必須在生物安全柜中進行,,在生物安全柜的工作臺面使用一次性防護罩,。實驗人員必須穿戴一次性防護、服(隔離衣和圍裙)和手套,,病理學家應戴特制的具有鋼絲網(wǎng)的兩層橡膠手套,。盡可能地使用一次性塑料器具,使用儀器設備,,不與其他實驗室共用儀器,。
含有朊蛋白的組織標本暴露于96%甲酸1小時可以基本失活。實驗廢棄物,包括一次性手套,、隔離衣和圍裙,,均應當采用多孔負荷蒸汽滅菌器在134~137℃高壓滅菌18分鐘一個循環(huán),或高壓滅菌3分鐘六個循環(huán),,然后再焚燒,。
朊蛋白的感染性廢液應當用終濃度含20g/L有效氯的次氯酸鈉處理1小時。污染的生物安全柜和其他表面可以采用含20g/L有效氯的次氯酸鈉處理1小時來清除污染,。不能高壓滅菌的用具可以反復用含20g/L有效氯的次氯酸鈉潤濕超過1小時來進行清潔,,并要求用水沖洗以清除殘留的次氯酸鈉。
操作朊蛋白相關組織還應注意:①鋼絲網(wǎng)手套由于不是一次性用品,,必須進行污染物的清除,。②朊蛋白對紫外線照射也具有抵抗力。雖然甲醛不能有效降低標本中朊蛋白感染性,,但安全柜仍必須用標準方法來清除污染(如甲醛蒸氣),,以滅活可能存在的其他微生物因子。③HEPA過濾器摘除后需要在至少1000℃的溫度下焚燒,。
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