我們?nèi)绾蝸碓u價一臺紫外可見分光光度計的優(yōu)劣呢,? 首先,,我們要來考察它的外觀。然后,,我們探討一下會對儀器的使用有很大影響的幾個重要指標(biāo):
1,、 雜散光 它指不應(yīng)該有光的地方有了光。它是光譜測量中誤差的主要來源,。這個值當(dāng)然越小越好了,。
2、 光度準(zhǔn)確度 光度準(zhǔn)確度指實際測量的光度讀數(shù)值與真值之差,。它是用戶對儀器的直接要求,,每個用戶都必須重視。
3,、 噪聲 噪聲也是儀器的重要指標(biāo)之一。它表征儀器的做稀溶液的能力,。這個指標(biāo)也是越小越好,。
4 、光譜帶寬 指從單色器射出的單色光譜線強度輪廓曲線的1/2高度處的譜帶寬度,。表征儀器的光譜分辨率,。按照比耳定律,光譜帶寬應(yīng)該是越小越好的,,但是如果儀器的光源能量弱,,光學(xué)傳感器的靈敏度低時,光譜帶寬小了,,也得不到理想的測量結(jié)果的,。所以,,選擇和使用儀器時一定注意。
5,、 穩(wěn)定性 穩(wěn)定性是使用者關(guān)注的指標(biāo)之一,。儀器的宗旨就是穩(wěn)定可靠,不穩(wěn)定更談不上可靠了,。
6,、 噪聲 噪聲也是儀器的重要指標(biāo)之一。它表征儀器的做稀溶液的能力,。這個指標(biāo)也是越小越好,。
7、 波長的準(zhǔn)確度和重復(fù)性 儀器的每個值都是在一定的波長下測得的,,如果所示的波長和實際波長偏差*,,那么測出的值和真值的吻合度從何談起呢?可見這個指標(biāo)的重要性,。
總之,,這幾個指標(biāo)都是相互獨立又相互關(guān)聯(lián)的,每個指標(biāo)對儀器的使用都有很大影響,。希望大家在選購紫外,、可見分光光度計時,多做比較,,多做判斷,,切實找到一個穩(wěn)定可靠的好幫手。
我們選擇時需要根據(jù)自己實驗室的需要 ,,主要考慮光學(xué)構(gòu)造和光源,、檢測方法、樣品類型和數(shù)據(jù)處理等因素,。
1.光學(xué)構(gòu)造
一般來說,,紫外光分光光度計分為單光束和雙光束兩類。1單光束型主要是依賴單束光進行測量,。一束給定波長的光通過對照物,,然后再通過實際樣品溶液,就能得到吸光結(jié)果,。
雙光束型則是通過一個斬光輪(mirrored chopper wheel)將一束光分成兩束,,分別測量對照樣品和實際樣品??梢孕』馄疲╨amp drift)和減少測量時間,。一些雙光型光度計不利用斬光輪,而是利用一種光束分光器來代替,,將一束光分成兩束平行的光然后同時測量對照樣品和目的樣品,。因為增加了測量的速度,,所以雙光束分光光度計在測量一些溶液隨時間動態(tài)變化的研究中大有用處。
2.樣品類型
在大部分的樣品類型中,,分光光度計可接受樣品孔,、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板,。
用小試管裝樣品容量一般從1 μl-5ml,,并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來滿足各種改變需要。
3.光源和檢測方法
分光光度計的光譜也是需要考慮的一個重要因素,。
紫外分光光度計一般覆蓋190nm和380nm波長,,通常利用氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿足光子學(xué)和半導(dǎo)體研究需要的光譜范圍,。
有的儀器可以選擇 多種光源 :紫外光,、可見光和甚至紅外光(780 nm 至3,000 nm)。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見光部分(大約380 nm 到800 nm),。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區(qū)域,。
分光光度計的帶寬(bandwidth)很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度??梢酝渡涑鰧嶒炓蟮墓庾V,。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對復(fù)雜的混合物進行高分辨率的吸光測量??勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺分光光度計滿足多種實驗需要,。
分光光度計通常使用光電倍增管和光敏二極管測量吸光值。
4.樣品類型
在大部分的樣品類型中,,分光光度計可接受樣品孔,、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板,。
用小試管裝樣品容量一般從1 μl-5ml,,并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來滿足各種改變需要。
5.數(shù)據(jù)管理
大部分單機型的分光光度計包含了驅(qū)動儀器運行和管理數(shù)據(jù)的軟件,。高性能的儀器,,通常與PC機一起聯(lián)用,需要從制造商提供額外的軟件,。
由此可見紫外、可見分光光度計是一種常規(guī)的實驗室分析儀器,??蓮V泛用于無機物、有機物的定性,、定量分析中,,在科研,、制藥、化工,、環(huán)保,、衛(wèi)生、防疫等領(lǐng)域中發(fā)揮重要的作用,。