上海橋星貿(mào)易有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口透析袋,密理博ECL發(fā)光液,B27無(wú)血清培養(yǎng)基,Gibco膠原酶 |
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參考價(jià) | ¥ 120 |
訂貨量 | 1 |
更新時(shí)間:2024-01-07 18:17:51瀏覽次數(shù):2455
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5×蛋白上樣緩沖液(配β-巰基乙醇)
產(chǎn)品組成
產(chǎn)品組成 | 規(guī)格 | 保存溫度 |
5×蛋白上樣緩沖液 | 10ml | 2-8℃ |
β-巰基乙醇 | 1ml | 常溫 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本產(chǎn)品適用于SDS-PAGE(SDS變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時(shí)作蛋白質(zhì)上樣用,。其主要成份為SDS,,β-巰基乙醇,溴酚藍(lán),,緩沖鹽溶液等,。
SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時(shí)蛋白質(zhì)本身的電荷*被SDS掩蓋,,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異,,SDS還可以斷開(kāi)分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu),,β-巰基乙醇可以斷開(kāi)半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,,破壞蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異,。zui終無(wú)電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞單位),,電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍(lán)用作電泳時(shí)的指示劑,,可大概指示電泳結(jié)束的時(shí)間,。
保存時(shí)間:
未混合前2-8℃可保存一年,混合后保存三個(gè)月,。
使用說(shuō)明:
1. 根據(jù)用量,以每1ml的5×蛋白上樣緩沖液加入50ulβ-巰基乙醇,,混勻,。此即為配好的蛋白上樣緩沖液。此配好的蛋白上樣緩沖液在2-8℃保存三個(gè)月,。
2. 請(qǐng)按每40微升蛋白樣品加入10ul配好的上樣緩沖液的比例來(lái)使用,。如果蛋白濃度過(guò)高,可用雙蒸水稀釋,。
3. 混勻后,,100℃水浴加熱3-5分鐘,使蛋白變性,。
4. 冷卻到室溫后,,離心數(shù)秒后,混均再離心30秒取上清直接上樣即可,。
注意事項(xiàng):
β-巰基乙醇味道特別難受,,所有操作是在通風(fēng)柜中操作,。如果沒(méi)有通風(fēng)柜,也盡量找一通風(fēng)處操作,,或者使用5×蛋白上樣緩沖液(含DTT),。
8%膠時(shí)溴酚藍(lán)大概在30kd左右, 12%膠時(shí),,約在20kd左右,,15%膠時(shí),大概在10kd,。請(qǐng)根據(jù)自己目標(biāo)條帶來(lái)判斷結(jié)果電泳時(shí)間,。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。