分離目的
方便在人體外對機(jī)體各種免疫細(xì)胞分別作鑒定，計(jì)數(shù)或功能測定,。淋巴細(xì)胞分離以后可以做淋巴細(xì)胞抗原片制備,，E花環(huán)試驗(yàn)，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn),，淋巴細(xì)胞培養(yǎng)（需無菌操作）【分離原理】人淋巴細(xì)胞的方便來源是外周血,，分離的原則是收率較高，純度較好,，失活較低,，根據(jù)不同試驗(yàn)有相對純度，無論采用哪種方法,，應(yīng)盡zui大可能保持細(xì)胞應(yīng)有活性,。分離的技術(shù)可根據(jù)細(xì)胞的物理性狀和表面標(biāo)志設(shè)計(jì)，根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)?zāi)康目刹捎妹芏忍荻入x心法,、吸附分離法和其它特殊分離法,。此次實(shí)驗(yàn)采用的1就是密度梯度離心法。其原理是：人外周血中各種細(xì)胞的密度不同,，人紅細(xì)胞密度為1.093,，粒細(xì)胞為1.092，淋巴細(xì)胞為1.074±0.001,。密度梯度離心法的原理主要根據(jù)各類血細(xì)胞比重的差異,，利用比重介于某兩類細(xì)胞之間的細(xì)胞分離液對血液離心，使一定比重的血細(xì)胞依相應(yīng)的密度梯度分布于不同的獨(dú)立帶,，從而達(dá)到分離的目的,。
材料
1、肝素抗凝管,，普通管（負(fù)壓）,，采血針,，血清收集管 2、淋巴細(xì)胞分離液(比重1.077 – 1.080 g/mL）,。 3,、無Ca++、Mg++,、Hank's 液 4,、刻度吸管、毛細(xì)吸管,、離心管,、離心機(jī)等。 5置于冰箱的冷丙酮（固定細(xì)胞,，保持細(xì)胞的完整性）
方法
1．采靜脈血2ml加入肝素抗凝管（或枸櫞酸鈉）,，3ml加入普通管。 2．普通管斜面放置30MIN,，此時(shí)可分離淋巴細(xì)胞,。用竹簽將血塊輕輕剝離管壁（主張用玻璃棒），2000rPm離心20分鐘,，用毛細(xì)吸管吸取上清（血清）于血清收集管中,，于4℃冰箱保存?zhèn)溆茫糜谝院蟮腅LISA實(shí)驗(yàn),，對流免疫電泳實(shí)驗(yàn)和傷寒試管凝集實(shí)驗(yàn),，溶血反應(yīng)，免疫比濁測定補(bǔ)體C3或C4等等,。（剝離時(shí)也可用毛細(xì)吸管輕輕剝離）

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