貼壁轉(zhuǎn)染與懸浮轉(zhuǎn)染在操作流程、時(shí)間成本,、轉(zhuǎn)染效率,、操作難度、細(xì)胞用量、觀察難度和適用場景上有所區(qū)別,。貼壁轉(zhuǎn)染通常需要較長時(shí)間等待細(xì)胞貼壁,，但操作簡單，轉(zhuǎn)染效率高,，適合常規(guī)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)和需要高效率轉(zhuǎn)染的場景,。懸浮轉(zhuǎn)染則時(shí)間成本較短，細(xì)胞用量更靈活,，適合快速篩選實(shí)驗(yàn)和大規(guī)模轉(zhuǎn)染。

02. 細(xì)胞培養(yǎng)與準(zhǔn)備

以LX2細(xì)胞為例,，這是一種人類肝星狀細(xì)胞的永生化細(xì)胞系,，廣泛用于肝臟研究。LX2細(xì)胞貼壁生長,，呈上皮細(xì)胞樣,。培養(yǎng)基成分為DMEM培養(yǎng)基，含10%胎牛血清和1%雙抗,。轉(zhuǎn)染前,，確保細(xì)胞處于良好生長狀態(tài)，活率需超過90%,。調(diào)整細(xì)胞轉(zhuǎn)染密度時(shí),，避免反復(fù)離心，以免影響細(xì)胞活力和轉(zhuǎn)染效率,。

03. 轉(zhuǎn)染操作

貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染優(yōu)選：ProteanFect轉(zhuǎn)染試劑盒

3.1 細(xì)胞準(zhǔn)備

提前一天種板,，準(zhǔn)備貼壁細(xì)胞。
在96孔板中加入約2.5×10^4細(xì)胞,，細(xì)胞過夜貼壁,。
待細(xì)胞匯合度為70%-80%時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，用Opti-MEM輕柔清洗細(xì)胞兩次,，并加入20 μL Opti-MEM備用。

3.2 配置ProteanFect轉(zhuǎn)染體系

在40 μL Reagent A中加入0.5 μg EGFP mRNA,，充分混勻,。
往上述混合物中加入1.4 μL Reagent B混勻。

3.3 轉(zhuǎn)染

將上述ProteanFect轉(zhuǎn)染液加入細(xì)胞,。
37℃培養(yǎng)箱孵育60分鐘,。
棄轉(zhuǎn)染液（為避免細(xì)胞損失，無需完·全棄盡）,。
加入200 μL完·全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，24小時(shí)后檢測EGFP mRNA表達(dá)，48小時(shí)后檢測GFP pDNA表達(dá)。

04. 轉(zhuǎn)染檢測

使用ProteanFect試劑盒轉(zhuǎn)染LX2細(xì)胞后,，可以通過熒光顯微鏡觀察EGFP的表達(dá),，評估轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞形態(tài)。細(xì)胞活率可通過鏡下觀察,、臺(tái)盼藍(lán)染色或流式細(xì)胞術(shù)等方法檢測,。

貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染優(yōu)選：ProteanFect轉(zhuǎn)染試劑盒

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