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有哪些技術可以在細胞中直接檢測RNA,?
閱讀:1412發(fā)布時間:2023-12-28
可以直接用于細胞中檢測RNA的實驗技術有很多,這些技術也各有優(yōu)缺點,,應根據(jù)具體的研究需求選擇最合適的技術:
RNA熒光原位雜交技術技術(RNA-FISH)的原理基于探針與靶序列的特異性結合,。首先,,研究人員會設計出與目標RNA序列互補的熒光探針,。這些探針在雜交緩沖液中與細胞中的目標RNA結合,,形成探針-靶RNA復合物。然后,,通過洗滌步驟去除未結合的探針,,最后用熒光顯微鏡觀察雜交信號的位置和數(shù)量。RNA-FISH的實驗流程包括樣品制備,、雜交,、洗滌及分析等步驟。首先,,研究人員需要準備樣品,,這通常涉及將組織或細胞固定在載玻片上,并進行適當?shù)念A處理以暴露出RNA,。然后,,將探針與樣品雜交,這一步驟需要控制溫度和濕度以確保探針與目標RNA的有效結合,。接下來是洗滌步驟,,目的是去除未結合的探針,最后對樣品進行熒光顯微鏡觀察和分析,。
聚合酶鏈反應(PCR):這是一種高通量,、高靈敏、可重復性高的分子生物學技術,,可以快速精確檢測感興趣的基因片段,,用于檢測基因的有無以及變異的存在。
Northern Blotting:這是一種傳統(tǒng)的RNA分析方法,,可用于檢測特定RNA分子的大小和豐度,。它可用于確定已知基因的轉(zhuǎn)錄起始位點、轉(zhuǎn)錄結束位點以及轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的處理情況,。
反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR):這是一種常用的RNA定量方法,,它首先通過反轉(zhuǎn)錄將RNA轉(zhuǎn)化為cDNA,然后使用PCR進行擴增,。RT-PCR可以用于檢測和定量特定基因的表達水平,。
核糖體展示(Ribosome Display):這是一種用于篩選蛋白質(zhì)的方法,通過將目標蛋白質(zhì)與核糖體結合,,然后進行翻譯和展示,。該技術可以用于篩選具有特定功能的蛋白質(zhì)或檢測細胞中表達的特定RNA。
細胞內(nèi)原位雜交(In Situ Hybridization):這是一種用于檢測細胞內(nèi)特定RNA的技術,,通過使用標記的探針與目標RNA雜交,,然后通過顯微鏡觀察雜交信號的位置和數(shù)量。
紅榮微再專注于分子診斷領域,早期技術團隊包含多名國內(nèi)大學生物與遺傳學科博士,,從多樣本核酸提取保存技術,、自主研發(fā)緩沖體系、抑制非特異性擴增技術逐步完成了紅榮微再PCR實驗方案,,實現(xiàn)PCR擴增效率以及檢測靈敏度的重大突破,,也奠定了紅榮微再以技術為根本,客戶為導向的研發(fā)模式,,建立以創(chuàng)新為驅(qū)動的技術發(fā)展平臺,。
2019年以來,經(jīng)歷社會,、市場的多種變化革新,,紅榮微再公司內(nèi)部也應運完成組織架構更新與產(chǎn)業(yè)布局的調(diào)整。公司確立“RNA,、NGS,、ctDNA、qPCR"四大方向并齊發(fā)展模式,,技術部門新設NIPT,、伴隨診斷、腫瘤早篩,、傳染病監(jiān)測,、實驗自動化設備等相關團隊,組織海外留學博士,、高新技術企業(yè)核心骨干完成新產(chǎn)品線的研發(fā)工作,,面對快速增長的市場下游需求,紅榮微再已初步完成多線產(chǎn)品的核心研發(fā)與標準化生產(chǎn),,主要包括核酸提取試劑盒,、qPCR試劑盒、測序試劑盒以及分子診斷類產(chǎn)品的基礎儀器耗材等多個類別,。
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