　　淋巴細(xì)胞分離液是一種根據(jù)細(xì)胞密度差異，借助離心產(chǎn)生的重力加速度,，進(jìn)行細(xì)胞的分離純化的常用試劑,。可用于體外分離外周淋巴血細(xì)胞，也可以從其他來(lái)源中分離單核細(xì)胞,，包括臍帶血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞,，適用于從血液及組織勻漿中分離所需細(xì)胞，在醫(yī)療和醫(yī)學(xué)生物中廣泛應(yīng)用,。其他人及動(dòng)物多種比重細(xì)胞分離液,。

　　下面讓我們一起來(lái)了解一下淋巴細(xì)胞分離液使用時(shí)需要注意的：

　　1.在正常大氣壓下，分離液,、分離樣本以及分離環(huán)境溫度為20℃±2℃,。分離液在低溫時(shí)呈較高密度，在高溫時(shí)呈較低密度,。細(xì)胞分離液從冰箱取出后,，不可立即使用，操作前可將樣本和分離液復(fù)溫至18-22℃,。為獲得理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,，在取血后2小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，血液提取后存放時(shí)間越長(zhǎng)細(xì)胞活性越低,。

　　2.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,，如需稀釋血液或洗滌細(xì)胞，不可使用含Ca、Mg離子的緩沖液及培養(yǎng)液,，其成分會(huì)導(dǎo)致血細(xì)胞凝集,，大大降低細(xì)胞得率及純度。

　　3.抗凝劑選擇：EDTA,、枸櫞酸,、肝素，其他抗凝劑也可使用,，但會(huì)影響細(xì)胞活性。應(yīng)注意在血液稀釋過(guò)程中去除抗凝劑體積,。

　　4.實(shí)驗(yàn)操作時(shí),，不可使用含粉手套、不可使用內(nèi)毒素含量過(guò)高的液體,，手套中的粉末顆粒及高內(nèi)毒素會(huì)激活淋巴細(xì)胞從而降低細(xì)胞得率及活性,。

　　5.不可使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品，其帶有的靜電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁影響分離效果,。推薦使用未經(jīng)過(guò)堿處理的玻璃離心管,。

　　6.吸取過(guò)多的淋巴細(xì)胞層及分離液層會(huì)導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒細(xì)胞數(shù)量增加。吸取過(guò)多的淋巴細(xì)胞層上層溶液會(huì)導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜,。

　　7.如需進(jìn)行B,、T細(xì)胞計(jì)數(shù)，則需血液貯藏時(shí)間不得多于10小時(shí),，否則將導(dǎo)致細(xì)胞被激活,，得率降低。

　　8.為去除所混雜的血小板,，可在分離液上層加上4-20%蔗糖梯度等滲溶液進(jìn)行二次離心,。

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了解一下淋巴細(xì)胞分離液的使用注意事項(xiàng)