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血清儲(chǔ)存以及解凍注意事項(xiàng)
閱讀：10263發(fā)布時(shí)間：2021-12-7
需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃至-70℃低溫冰箱中,，4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)一個(gè)月,。
由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%，因此,，血清在凍入低溫冰箱,，必須預(yù)留定體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选?nbsp;
瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法：
1,、-20℃至-70℃血清低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,；
2、然后移入室溫或者可以置于37℃水浴中,，不斷搖動(dòng)待全部溶解后再分裝,。
注意：
1、在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡）,，使溫度與血清成分均一,，減少沉淀的發(fā)生；
2,、切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,；
3,、若一次無(wú)法用完一瓶，無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),，再放回冷凍,。
1）血清化凍為什么是渾濁的？
血清制備過(guò)程中會(huì)保留部分纖維蛋白原,，化凍過(guò)程中纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,，使血清中出現(xiàn)渾濁，絮狀物,。這種情況不影響血清的功效,。
血清化凍過(guò)程中，在37℃水浴中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),，也會(huì)導(dǎo)致沉淀產(chǎn)生,，沉淀物包含磷酸鈣結(jié)晶。沉淀物也不影響血清功效,。
去除方法：
可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),，以400g稍微離心，將上清液加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾,。也可直接過(guò)濾血清以去除這些絮狀物,。
2）血清熱滅活（除非必須，一般不建議作此熱處理）
血清為何要滅活,？
血清熱滅活是將血清置于56℃水浴至*解凍,。可滅活其中補(bǔ)體系統(tǒng)中具有蛋白酶活性的成分,。補(bǔ)體是免疫系統(tǒng)的成分,。對(duì)于那些培養(yǎng)困難的細(xì)胞、用于病毒檢測(cè)的細(xì)胞,、用于細(xì)胞毒性檢測(cè)很重要,，可避免補(bǔ)體帶來(lái)的不利影響,。單熱滅活也破壞血清中的生長(zhǎng)因子，所以除非必需,，血清才滅活處理,。
啟動(dòng)的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮,，細(xì)胞和血小板釋放組胺,，啟動(dòng)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞活化。在免疫學(xué)研究,、培養(yǎng)ES細(xì)胞,、昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清,。
血清滅活的正確方法
(1)按照前面的介紹正確化凍,；
(2)水浴預(yù)熱56℃。水量要足夠,，水深要超過(guò)瓶中血清的高度,；
(3)輕輕搖動(dòng)已解凍的血清，置于水浴中,，水位可能會(huì)下降,；
(4)待水溫重新到56℃時(shí)，再計(jì)時(shí)30分鐘,；
(5)從水浴中拿出血清,，待冷卻。-20/-70℃存放,。
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