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了解一下使用功能細(xì)胞培養(yǎng)基有哪些是必須
閱讀：1682發(fā)布時(shí)間：2021-5-25
下面讓我們一起來(lái)了解一下使用功能細(xì)胞培養(yǎng)基有哪些是必須的吧。
一,、細(xì)胞培養(yǎng)必需的溶液
平衡鹽水(BSS):Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,。PH調(diào)整液:3.7%、5.6%,、7.4%的NaHCO3溶液,、HEPES溶液(二乙烷磺酸)
細(xì)胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液,、膠原酶溶液,。
二、抗生素溶液:
1)青,、鏈霉素,，每毫升培養(yǎng)液含100U青霉素和100ug鏈霉素。
2)卡那霉素:終濃度為50ug/ml培養(yǎng)液,。
3)制霉菌素:濃度25U/ml,，小瓶分裝，每瓶一次用完,。
常用的動(dòng)物血清主要有牛血清和馬血清,。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清,，前者來(lái)源少，價(jià)格高;后者要求剛產(chǎn)下尚未哺乳的小牛,，因?yàn)椴溉楹蟮男∨Ｑ逯锌赡芎懈鼜?fù)雜的成分,。血清中已知的成分主要有蛋白質(zhì)、氨基酸,、葡萄糖,、激素等。蛋白質(zhì)主要是白蛋白和球蛋白,。
氨基酸是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,，氨基酸中有12種是細(xì)胞本身不合成的，必須由培養(yǎng)液提供,。激素有胰島素,、生長(zhǎng)激素和多種生長(zhǎng)因子如表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子,、增殖刺激因子(MSA),、類胰島素生長(zhǎng)因子(IGFl、IGF2)等,。
水解乳蛋白,、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產(chǎn)物,，呈蛋黃色粉末狀,，富含氨基酸。一般配制成0.5%溶液,，微酸性,。膠原是從動(dòng)物真皮中提取的，具改善細(xì)胞表面特性促使其附著生長(zhǎng)的作用,。
合成培養(yǎng)基
1951年厄爾開(kāi)發(fā)了供動(dòng)物細(xì)胞體外生長(zhǎng)的人工合成培養(yǎng)基(MEM),。合成培養(yǎng)基的種類相當(dāng)多。合成培養(yǎng)基成分已知,，便于對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的控制,。但與天然培養(yǎng)基相比，有些天然的未知成分尚無(wú)法用已知的化學(xué)成分所替代,，因此,，細(xì)胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分，以克服合成培養(yǎng)基的不足,。普遍的作法是加入小牛血清,。
動(dòng)物血清成分復(fù)雜，各種生物大小分子混合在一起,，有些成分至今尚未搞清楚,。血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)很有效,，但后期對(duì)培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測(cè)造會(huì)成一定困難,。另外高質(zhì)量的動(dòng)物血清來(lái)源有限,，成本高，限制了它的大量使用,。
無(wú)血清培養(yǎng)基不加動(dòng)物血清,，在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細(xì)胞生長(zhǎng)有效因子，激素等,。
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