　　細胞轉(zhuǎn)入無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)要有一個適應(yīng)過程,，一般要逐步降低血清濃度，從10%減少到5%,，3%,，1%，直至無血清培養(yǎng),。在降低過程中要注意觀察細胞形態(tài)是否發(fā)生變化,，是否有部分細胞死亡，存活細胞是否還保持原有的功能和生物學(xué)特性等,。

　　在實驗后這些細胞一般不再繼續(xù)保留,，很少有細胞能夠長期培養(yǎng)于無血清培養(yǎng)基而不發(fā)生改變的。細胞轉(zhuǎn)入無血清培養(yǎng)之前,，要留有種子細胞,，種子細胞按常規(guī)培養(yǎng)于含血清的培養(yǎng)基中，以保證細胞的特性不發(fā)生變化,。

　　為了使細胞適應(yīng)無血清培養(yǎng),，關(guān)鍵的是使所培養(yǎng)細胞:

　　1.處于對數(shù)生長中期

　　2.>90% 活細胞率

　　3.適應(yīng)時以較高的起始細胞接種

　　細胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基的方法

　　1.直接適應(yīng)--細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到無血清培養(yǎng)基(SFM)中。

　　一些類型細胞可直接從包含血清的培養(yǎng)基適應(yīng)無血清培養(yǎng)基,。對于直接適應(yīng),，接種細胞密度應(yīng)該:2.5×10~3.5×10細胞/ml。當(dāng)細胞密度達到1×10~3×10細胞/ml時,，傳代培養(yǎng)細胞,。當(dāng)細胞密度在培養(yǎng)4到7天后達到2×10~4×10細胞/ml時,，細胞*適應(yīng)了無血清培養(yǎng)基。每隔3~5天,，當(dāng)細胞密度達到1×10~3×10細胞/ml,，細胞活率在90%時，貯備的適應(yīng)了無血清培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)物應(yīng)該再次傳代培養(yǎng),。

　　2.連續(xù)適應(yīng)--分好幾步把細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到無血清培養(yǎng)基(SFM)中,，與直接適應(yīng)相比較，連續(xù)適應(yīng)趨向?qū)τ诩毎訙睾鸵恍?br />

　　(1)以2倍正常接種密度接種生長活躍的細胞培養(yǎng)物到75%有血清培養(yǎng)基:25%SFM 混合培養(yǎng)基中,，傳代培養(yǎng),。

　　(2)當(dāng)細胞密度>5×10細胞/ml時，以2×10到3×10細胞/ml細胞密度,，在有血清培養(yǎng)基:SFM為50∶50的混合培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng),。

　　(3)以2×10到3×10細胞/ml細胞密度，25%有血清培養(yǎng)基和75% SFM中傳代培養(yǎng),。

　　(4)當(dāng)細胞密度達到1×10到3×10細胞/ml(接種后4到6天),，在100%SFM培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng),。

　　(5)每隔3到5天,，當(dāng)細胞密度達到1×10到3×10細胞/ml，細胞活率在90%時,，貯備的適應(yīng)了無血清培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)物應(yīng)該再次傳代培養(yǎng),。

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