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影響MSC干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基滅菌的因素
閱讀:1934發(fā)布時間:2019-5-28
1,、營養(yǎng)成分的保持
濕熱滅菌時,,微生物被殺死的同時,培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞,,特別是氨基酸和維生素,。如在121℃,僅20min,,就有59%的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞,,蛋氨酸和色氨酸也有相當(dāng)數(shù)量被破壞。在熱的作用下某些營養(yǎng)成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應(yīng),,造成培養(yǎng)基中原有營養(yǎng)成分的數(shù)量變化,,因而影響培養(yǎng)基質(zhì)量。
2,、微生物的耐熱性
細(xì)菌芽孢的熱阻較大,,滅菌所需要的時間取決于把細(xì)菌芽孢減少到所規(guī)定數(shù)目的時間。
3,、pH值
pH值對微生物的耐熱性影響很大,。pH值介于6.0~8.0時,微生物不易死亡,。pH<6.0時,,微生物比較容易死亡,此時PH很容易滲入微生物的細(xì)胞,,從而改變細(xì)胞的生理反應(yīng),,促使其死亡。所以培養(yǎng)基的pH越低,,所需的時間也越短,。
4,、培養(yǎng)基的成分
油脂、糖類及蛋白質(zhì)等組成的高濃度有機(jī)物會包于細(xì)胞的周圍形式一層薄膜,、影響熱的傳導(dǎo),。而高濃度的鹽類、色素則削弱其耐熱性,,滅菌較易,。例如:大腸桿菌在水中加熱至60-65℃便死亡,在10%糖液中需70℃加熱4-6分鐘才死亡,,在30%糖液中需30分鐘才死亡,。一般糖類含量較多的時候選用115℃,30分鐘;一般的培養(yǎng)基可選擇121℃20分鐘,。
5,、泡沫
泡沫中的空氣形成隔熱層,使熱量難以滲透進(jìn)去,,殺死其中的雜菌,。
6、顆粒
顆粒小,,容易滅菌,,顆粒大,則難滅菌,。對于含有少量較大顆粒及粗纖維的培養(yǎng)基,,可用粗濾的方法(不應(yīng)影響培養(yǎng)基質(zhì)量)予以除去,培養(yǎng)基結(jié)塊會造成培養(yǎng)基滅菌的不*,。
7,、滅菌鍋內(nèi)空氣是否排凈
這個是影響滅菌是溫度和壓力比例關(guān)系的要點(diǎn),同樣達(dá)到了相同的壓力的情況下,,如果空氣未能排凈,,也就是說不是純蒸汽滅菌,此時的溫度不一定能達(dá)到目的要求,,會嚴(yán)重影響滅菌效果
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