（2）校正酸堿度（調(diào)節(jié)pH）：培養(yǎng)基必須有適當?shù)膒H。因此測定pH是培養(yǎng)基配制過程中的重要步驟之一,，測定pH的標準溫度為25士2℃,。調(diào)節(jié)pH可用無菌的1mol/l氫氧化鈉溶液或10%碳酸鈉溶液、1mol/l鹽酸溶液,。當調(diào)節(jié)緩沖液的pH時,，宜用6mol/l磷酸或10mol/l氫氧化鉀溶液。滅菌后的pH會比滅菌前的pH升高或降低,，一般高壓滅菌前培養(yǎng)基的pH會比終pH調(diào)高0.2左右,，滅菌后基本合適。因此對培養(yǎng)基,、緩沖液,、試劑在滅菌前后的pH均進行測定，并記下每次pH的測定結果,，有助于積累數(shù)據(jù)考察每種培養(yǎng)基,、緩沖液、試劑對滅菌程序的耐受性,，從而指導滅菌前pH的調(diào)節(jié),。干燥培養(yǎng)基一般已校正過pH，用時也必須再驗證,。測定時,，一般用指示劑滴入培養(yǎng)基觀察其顏色的變化，或用pH計校正,，如與所需pH不符,，可用以上的酸或堿液加以校正。調(diào)整pH后要加熱過濾,，使培養(yǎng)基澄清,。

（3）培養(yǎng)基的分裝：大批量配制時使用的自動分配器須經(jīng)校準和確認。每次使用前后,，均要對分配器的管道系統(tǒng)進行沖洗,，在分裝無菌培養(yǎng)基前，則要采用無菌硅膠管,。

固體培養(yǎng)基一般分裝在250ml,、500ml錐形瓶中,，高壓滅菌后根據(jù)需要分裝平皿或試管。

平皿：傾注平皿,，應在無菌室中放置3—4h,，如用塑料平皿須在35℃培養(yǎng)箱中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發(fā),。

斜面：制備低層斜面分裝于試管,，約占容積1/5，滅菌后趁熱斜放在細玻璃棒和木桿上,，使成斜度,，分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養(yǎng)基，如沾有培養(yǎng)基應用布抹去,，以避免污染,。

高層斜面：制備高層斜面分裝于試管，約占試管容積的1/3,，滅菌后趁熱放置成高層短斜面,，待其凝固后應用。

分裝好的培養(yǎng)基或緩沖液等及時密封后必須在配制當天（2h內(nèi)）進行滅菌處理,。液體,、半固體培養(yǎng)基一般在高壓滅前分裝，約裝試管容積的1/3,，在滅菌后還要加其他成分的液體,、半固體培養(yǎng)基，滅菌后再分裝于滅菌試管或錐形瓶中,。

培養(yǎng)基的滅菌：培養(yǎng)基的滅菌多采用高壓蒸汽滅菌,，各種培養(yǎng)基的滅菌時間和壓力，按其成分不同而定,。普通培養(yǎng)基采用121℃,、103.42kPa滅菌15min，但容器和裝量較大時,，應延長至20min,。含糖培養(yǎng)基115℃、68.85kPa滅菌30min,。含糖,、血清、雞蛋等培養(yǎng)基可用流動蒸汽及血清凝固器80—100℃,、30min,，連續(xù)3d，間歇滅菌,。血清或組織液,，采用低熱56—58水浴1h,，連續(xù)5—6d滅菌，一些遇高溫即被破壞的物質如尿素,、腹水等,，可用細菌過濾器，過濾除菌,。高壓滅菌應嚴格按照操作規(guī)程執(zhí)行,，必須逐漸加熱，*排除滅菌器內(nèi)的空氣,，再逐漸升壓保持預定的壓力和時間，達到全部殺滅微生物,。以上的滅菌時間和溫度要經(jīng)過驗證確認,，如不同類型培養(yǎng)基混合一起滅菌時宜采用115℃、68.85kPa滅菌30min為好,。

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