 | 紅榮微再（上海）生物工程技術(shù)有限公司 |
15021010459
在線溝通：
顏先生 （銷售）
- 電話：
- 400-021-2200
- 手機(jī)：
- 15021010459
- 傳真：
- 聯(lián)系我時,，
- 告知來自化工儀器網(wǎng)
- 個性化：
- www.hyrmb.com.cn
- 商鋪網(wǎng)址：
- http://sorrent.com.cn/st321032/
- 公司網(wǎng)站：
- www.hyrmb.com
人間充質(zhì)干細(xì)胞流式檢測方案
閱讀：8102發(fā)布時間：2017-12-28
人間充質(zhì)干細(xì)胞流式抗體鑒定流程
準(zhǔn)備細(xì)胞
抗體染色
上機(jī)檢測
人間充質(zhì)干細(xì)胞流式鑒定操作步驟
1,、準(zhǔn)備細(xì)胞：取培養(yǎng)的細(xì)胞離心（300 g/5min）,，棄去上清, 加入一定量PBS洗滌一次,，棄去上清，彈散細(xì)胞,，細(xì)胞重懸到5×106~10×106之間。
2,、MSC人間充質(zhì)干細(xì)胞流式鑒定配色方案：
取100 ml的細(xì)胞于EP管或流式管內(nèi),，分三管染色。
*管 陽性配色 Anti-human CD90 FITC, Anti human CD105 APC,，Anti-human CD45 PE-Cy7各加5 ml,。
第二管 陰性配色 Anti-human HLA-RA FITC, Anti-human CD34 PE-Cy7, Anti-human CD73 APC各加5 ml。
第三管同型對照 Mouse IgG1 K Isotype Control FITC 0.6 ml,，Mouse IgG1 Isotype Control PE-Cy7 1.2 ml,，Mouse IgG1 Isotype Control APC 1.2 ml。
配色依據(jù)：細(xì)胞治療協(xié)會間充質(zhì)和組織干細(xì)胞委員會2006年提出了MSC鑒定的zui低標(biāo)準(zhǔn),，關(guān)于細(xì)胞表型的要求是表達(dá)CD90,， CD105和CD73不表達(dá)CD45, CD34, CD14或CD11b, CD79a或CD19和HLA-DR；陽性指標(biāo)都需要染色,，陰性指標(biāo)一般選擇2-3個指標(biāo),，因?yàn)槭亲黾?xì)胞表型鑒定，所以要配齊同型對照,。
3,、加入相應(yīng)的抗體后混勻，建議彈管子,，盡量不用槍頭直接吹打,，室溫避光孵育15 min，染色過程中再混勻一次,。
4,、染色完成后加入1 ml的PBS洗滌細(xì)胞，離心300 g/5min,。
5,、棄去上清，彈散細(xì)胞,，加入500 ml PBS重懸,，上機(jī)檢測。
注意：1,、同型對照是根據(jù)染色抗體的用量來計算的,，所以每種同型對照可能加入量可能不一樣（具體可看后文同型對照章節(jié)的介紹）。
2,、先上機(jī)檢測同型對照管,，各檢測通道以這一管的信號設(shè)為陰性,，在上機(jī)檢測抗體染色管。
3,、zui后結(jié)果的顯示用峰圖來表示,，每種抗體的檢測結(jié)果都與對應(yīng)的同型對照染色結(jié)果疊加展示（ overlay ）。
MSC人間充質(zhì)干細(xì)胞流式鑒定結(jié)果
注意：CD90表達(dá)量非常高,，所以建議用FITC熒光染料,，F(xiàn)ITC/PE-Cy7/APC這三種熒光染料之間幾乎沒有補(bǔ)償，所以這三種染料一起染色不需調(diào)節(jié)補(bǔ)償,，如果是做臍帶干細(xì)胞的鑒定,，CD105抗體選擇SN6克隆號，其他克隆號染色結(jié)果不好（某些克隆號染不上）,。
MSC人間充質(zhì)干細(xì)胞流式配色抗體產(chǎn)品
品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格 |
BioGems | 03011-50 | Anti-Human CD90 (Thy-1) FITC | 25 test/100 tests | 25 test 1540元 |
BioGems | 07111-77 | Anti-Human CD45 PE-Cy7 | 25 test/100 tests | 25 test 1680元 |
BioGems | 17111-80 | Anti-Human CD105 (Endoglin) APC | 25 test/100 tests | 25 test 2170元 |
BioGems | 74111-50 | Anti-Human HLA-DR FITC | 25 test/100 tests | 25 test 1400元 |
BioGems | 06411-77 | Anti-Human CD34 PE-Cy7 | 25 test/100 tests | 25 test 2170元 |
BioGems | 05811-80 | Anti-Human CD73 APC | 25 test/100 tests | 25 test 1960元 |
|
| 同型對照 | 總價 | 10920元 |
BioGems | 44212-50 | Mouse IgG1 K Isotype Control FITC | 100 mg | 1120元 |
BioGems | 44212-77 | Mouse IgG1 Isotype Control PE-Cy7 | 100 mg | 1890元 |
BioGems | 44212-80 | Mouse IgG1 Isotype Control APC | 100 mg | 1750元 |
MSC人間充質(zhì)干細(xì)胞流式鑒定配色方案由Biogems提供,。
上游產(chǎn)品 人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基
HY STEMCELL CCGmHuMTM 人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基是成分確定、無血清,、無異源物,，無需鋪板膠的*培養(yǎng)基。適用臍帶或脂肪來源的人間充質(zhì)干細(xì)胞的原代培養(yǎng)擴(kuò)增,。培養(yǎng)的hMSC可傳多代,。
背景知識
間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）來源于中胚層,，是一種類似成纖維細(xì)胞樣形態(tài),，貼壁生長，表達(dá)CD105,、CD73,、CD90，不表達(dá)CD45,、CD34,、CD14或CD11b、CD79a或CD19的細(xì)胞,；它可以從骨髓,、脂肪、臍帶華通氏膠,、胎盤,、臍帶血、牙髓,、絨毛膜等多種組織中被分離出來；它是具有高度自我更新能力和多向分化潛能的多能干細(xì)胞,，能體外培養(yǎng)并在特定條件下分化為神經(jīng)細(xì)胞,、成骨細(xì)胞,、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等,。MSCs在細(xì)胞治療中有廣泛的用途,，包括組織工程、再生醫(yī)學(xué)和被用作基因治療的載體,。
MSC人間充質(zhì)干細(xì)胞流式產(chǎn)品代理,，華雅人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基銷售歡迎您致電 華雅再生醫(yī)學(xué)旗艦公司：紅榮微再（上海）生物工程技術(shù)有限公司
以上信息由企業(yè)自行提供,，信息內(nèi)容的真實(shí)性,、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，化工儀器網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任,。 溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險,，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。