	試劑級別重組人胰島素	藥物級別重組人胰島素
舉例	重組人胰島素	優(yōu)泌林 70/30	諾和靈 30R
英文名	Recombinant Human Insulin	Humulin 70/30	Novomix30
生產廠家	PeproTech (BioGems)	禮來(Lilly)	諾和諾德(Novo Nordisk)
劑型	凍干粉 (不含任何添加物和賦形劑)	藥用針劑 (液體)	藥用針劑 (液體)
儲存條件	-20°C	2-8°C	2-8°C
表達細胞	畢赤酵母	大腸桿菌	釀酒酵母
成分	重組人胰島素	30%重組人胰島素 70%精蛋白鋅重組人胰島素	30%可溶性胰島素 70%低精蛋白鋅胰島素
輔料	無	甘油磷酸氫二鈉硫酸魚精蛋白氧化鋅蒸餾間甲酚(1.6mg/ml) 苯酚(0.65mg/ml)	甘油磷酸氫二鈉硫酸魚精蛋白氯化鋅間甲酚(1.6mg/ml) 苯酚(0.65mg/ml)

藥品與試劑不同，藥品有不同的劑型,，如片劑,、針劑、膠囊劑和栓劑等十多種,。即使對

于同一種劑型,，其中還可分為若干亞型，如針劑包括注射水針劑,、注射油針劑,、中草藥注射

劑，以及注射用滅菌粉末等,。而且藥品通常保存于室溫或 2 - 8°C,。這就要求藥品在制備過

程中除了包含藥物本身(通常稱為主藥)外，還必須加入一些有助于制劑成型(如賦形劑),、穩(wěn)

定(如抑菌劑),、增溶和助溶等具有不同作用的輔料，也就是說藥品中含有很多非藥品成分,。

將藥品添加入無血清培養(yǎng)基中進行細胞培養(yǎng)時,，不可避免地會引入諸多不確定的因素，一方

面可能會對細胞的生長或分化產生影響,，另一方面可能會帶來非預期的實驗結果,。而藥物輔

料對培養(yǎng)細胞的作用又很難通過設立輔料對照來確定，因為輔料的成分過于復雜,，且通常藥

廠并不公開輔料的具體組分,。

下面我們以藥物級別的重組人胰島素為例來看一下輔料對體外細胞培養(yǎng)的可能影響。

表4：藥物級別重組人胰島素中的輔料

輔料	輔料在胰島素藥物中的功能	輔料對體外細胞培養(yǎng)的可能作用
甘油	穩(wěn)定劑,，增溶,，調節(jié)滲透壓和表面張力	對某些細胞具有細胞毒性和影響細胞滲透壓的作用[1]
磷酸氫二鈉	調節(jié) pH 值	無
硫酸魚精蛋白	調節(jié)胰島素在體內的釋放速度(緩釋劑)	對某些細胞具有抑制增殖的作用[2]
氧化鋅	沉淀穩(wěn)定劑，促使重組人胰島素形成六面體的結晶型沉淀	對細胞具有較強的基因毒性和細胞毒性[3],。
間甲酚	抑菌劑(防腐劑)	具有細胞毒性,，可致細胞凋亡和 DNA 損傷[4] 與白蛋白(albumin)和明膠(gelatin) 不兼容,，會形成沉淀[5]
苯酚	抑菌劑(防腐劑)

從上表可以看出，胰島素藥物中的輔料均具有一定的負面生物學功能,，這些功能在藥物

用于人體內治療時不會顯現(xiàn),，因為人體具有肝臟等解毒器官，低濃度的有害物質短期內不會

對人體的組織產生影響,。但當藥物用于體外細胞培養(yǎng)時,，因為藥物中的輔料會直接、*地

作用于細胞,，這些輔料的副作用更容易顯現(xiàn)出來,。雖然當藥物加入細胞培養(yǎng)體系時，輔料的

濃度可能已經降得很低,，但不排除這些輔料或多或少仍會對細胞的生長或分化產生某些影響,。

另外，無血清培養(yǎng)基體系中所必須添加的組分-白蛋白(albumin)與胰島素藥物中的輔

料-苯酚和間甲酚會形成沉淀,，從而在一定程度上影響白蛋白的功能,。其實，已經證實苯酚

的衍生物 - 酚紅(phenol red)有干擾某些細胞的克隆性生長的作用,，所以用于培養(yǎng)干細胞或

生長密度比較低的細胞的無血清培養(yǎng)基中通常不添加酚紅,，盡管培養(yǎng)基中因此會缺少酸堿指

示劑。

綜上所述,，配制用于體外細胞培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基使用不含任何輔料的試劑級別胰

島素,，以避免輔料可能給細胞帶來的危害以及實驗結果不確定性的增加。

參考文獻

[1] Armitage WJ and Mazur P. Toxic and osmotic effects of glycerol on human granulocytes. Am J

Physiol. 1984;247(5 Pt 1):C382-9.

[2] Leibovich SJ and Polverini PJ. Protamine sulfate inhibition of serum-induced mitogenic responses:

differential effects on normal and neoplastic cells. J Natl Cancer Inst. 1984;73(6):1337-47.

[3] Osman IF, Baumgartner A, et al. Genotoxicity and cytotoxicity of zinc oxide and titanium dioxide in

HEp-2 cells. Nanomedicine (Lond). 2010;5(8):1193-203.

[4] 王源源等,。苯酚致 V79 細胞毒性及 DNA 損傷效應的研究,。工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病，2011,；(2)：78-81,。

[5] Rowe RC, Sheskey PJ, et al. Handbook of Pharmaceutical Excipients (sixth edition).

Pharmaceutical Press. 2009; p485-6.

資料來源：BioGems

BioGems無血清細胞培養(yǎng)添加物—轉鐵蛋白和胰島素

白蛋白、胰島素和轉鐵蛋白等是無血清培養(yǎng)體系中細胞生長所必須的因子,。

Biogems的人重組轉鐵蛋白和胰島素生物活性與天然蛋白相同,，批間穩(wěn)定。這些蛋白由真核細胞重組表達,，不含動物成分,。質控嚴格，zui大程度地降低了污染的風險,。

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