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　　二手液相色譜儀是分析實驗室常用的測試儀器之一，其應(yīng)用越來越廣泛,。此種儀器在使用過程中,，難免會出現(xiàn)各種各樣的問題，并將直接影響到所測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和儀器的正常工作,。操作者如果能了解故障的成因,，即可清楚預(yù)防和排除這些故障的方法，就可正確地使用儀器并大限度地發(fā)揮儀器的性能,。今天我們要從以下幾個方面和您分享下在使用二手液相色譜儀中需注意的幾個問題,。

 

　　二手液相色譜儀使用的問題

 

　　1、試管的潔凈問題,。液相色譜分析法是一個很靈敏的分析方法,，如果因使用不潔凈的試管，便會影響試驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,。例如,，在用甲醇作溶劑來溶解樣品時，所用的小試管是用橡膠塞來做蓋子的,，因此,，在每次進樣時，都有一個保留時間固定的干擾峰存在,，后經(jīng)證實,，此干擾峰是由甲醇浸泡橡膠塞而溶下的組分所產(chǎn)生，換用玻璃試管后,，干擾峰消除,。

 

　　2、塑料試管的溶解問題,。近年來,，一次性塑料試管給試驗人員帶來了極大的方便，但是,，在使用過程中一定要注意有機溶劑對試管的溶解現(xiàn)象,，在利用此種試管提取樣品時,，有些有機溶劑(如等)對管壁有溶解現(xiàn)象，這些被溶解下來的物質(zhì)有時也能在檢測器上產(chǎn)生信號,，從而干擾樣品的測定,。這時，可用相同的實驗條件先行試驗一下,，看看不含被抽提物時,，提取液在檢測器上能否產(chǎn)生干擾信號，如確有干擾信號存在,，就只能換用耐有機溶劑的玻璃試管了,。

 

　　3、被測樣品在試管壁上的吸附問題,。這個問題也應(yīng)引起注意,，否則也會影響測試結(jié)果的準(zhǔn)確性，在治療藥物監(jiān)測中,，有些被測藥物如阿米替林,，丙咪嗪等易吸附在玻璃試管的管壁上，因此,，操作中宜采用聚丙烯管,，為防止提取中吸附現(xiàn)象的發(fā)生，可采用0.5%的已二胺已烷液做為提取劑,，可有效地防止吸附,。

 

　　造成這種情況的原因是系統(tǒng)中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物,，使得兩者不能密封,。處理工作中注意觀察流動相的量，保證不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底,，避免吸入空氣,，流動相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物,，拆下單向閥,，放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。

 

　　主要原因可能有進樣閥漏液,、加樣針不到位或液量不足,。針對種情況，處理時應(yīng)對更換進樣閥墊圈,；對于第二種情況保證加樣針插到底,，注射樣品溶液后須快速、平穩(wěn)地從LOAD狀態(tài)轉(zhuǎn)換到INJECT狀態(tài),，以保證進樣量的準(zhǔn)確,。日常工作中,，液相色譜儀的保養(yǎng)非常重要，如要注意不要讓空氣進入輸液系統(tǒng)和高壓泵中,，儲液器內(nèi)的溶液如長時間未用應(yīng)清洗儲液器并更換溶液,，每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈，防止無機鹽析出或沉積,；樣品的前處理也很重要,，任何樣品都要盡可能地去除雜質(zhì)，*溶解,，盡量減少對色譜柱的污染,，以延長色譜柱的使用壽命，同時避免注射過濃的樣品溶液,，以免殘留液在進樣閥內(nèi)析出固體引起堵塞,；色譜柱作好標(biāo)記，用于不同分析目的的色譜柱不要混用等,。

 

　　對二手液相色譜儀的要求

 

　　1.流動相必須用HPLC級的試劑,，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45μm或更細的膜過濾)。

 

　　2.流動相過濾后要用超聲波脫氣,，脫氣后應(yīng)該恢復(fù)到室溫后使用,。

 

　　3.不能用純乙腈作為流動相，這樣會使單向閥粘住而導(dǎo)致泵不進液,。

 

　　4.使用緩沖溶液時,，做完樣品后應(yīng)立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時，然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,，以充分洗去離子,。對于柱塞桿外部，做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上,。

 

　　5.長時間不用儀器,，應(yīng)該將柱子取下用堵頭封好保存，注意不能用純水保存柱子,，而應(yīng)該用有機相(如,，甲醇等)，因為,，純水易長霉,。

 

　　6.每次做完樣品后應(yīng)該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。

 

　　7.C18柱不能進蛋白樣品,，血樣,、生物樣品。

 

　　8.堵塞導(dǎo)致壓力太大，按預(yù)柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗,，清洗方法：

 

　?、僖援惐甲魅軇_洗；

 

　?、诜旁诋惐贾虚g用超聲波清洗,；

 

　　③用10％稀硝酸清洗,；

 

　　9.氣泡會致使壓力不穩(wěn),，重現(xiàn)性差，所以在使用過程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡,。

 

　　10.如果進液管內(nèi)不進液體時,，要使用注射器吸液：通常在輸液前要進行流動相的清洗。

 

　　11.要注意柱子的pH值范圍,，不得注射強酸強堿的樣品,，特別是堿性樣品。

 

　　12.更換流動相時應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,，然后插入新的流動相中,。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。