對于二手液相色譜儀使用操作要求
閱讀:616 發(fā)布時間:2018-5-23
二手液相色譜儀是一類分離與分析技術(shù),,其特點是以液體作為流動相,,固定相可以有多種形式,,如紙,、薄板和填充床等,。在色譜技術(shù)發(fā)展的過程中.為了區(qū)分各種方法,,根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名,,如,紙色譜,、薄層色譜和柱液相色譜,。
對二手液相色譜儀的要求
1、流動相必須用HPLC級的試劑,,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45μm或更細的膜過濾),。
2、流動相過濾后要用超聲波脫氣,,脫氣后應該恢復到室溫后使用,。
3、不能用純乙腈作為流動相,,這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液,。
4,、使用緩沖溶液時,做完樣品后應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時,,然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,,以充分洗去離子。對于柱塞桿外部,,做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上,。
5、長時間不用儀器,,應該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,,而應該用有機相(如,,甲醇等),因為,,純水易長霉,。
6、每次做完樣品后應該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器,。
7,、C18柱不能進蛋白樣品,血樣,、生物樣品,。
8、堵塞導致壓力太大,,按預柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗,,清洗方法:
①以異丙醇作溶劑沖洗,;
?、诜旁诋惐贾虚g用超聲波清洗;
?、塾?0%稀硝酸清洗,;
9、氣泡會致使壓力不穩(wěn),,重現(xiàn)性差,,所以在使用過程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡。
10,、如果進液管內(nèi)不進液體時,,要使用注射器吸液:通常在輸液前要進行流動相的清洗。
11,、要注意柱子的pH值范圍,,不得注射強酸強堿的樣品,,特別是堿性樣品。
12,、更換流動相時應該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,,二手液相色譜儀然后插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下,。
原因有以下三點:
?。?)流動相過濾在理論上有好處,但是,,實際操作時由于不可能做到專瓶,,反而容易造成的交叉污染,對于配比復雜的流動相影響更大,。
?。?)流動相過濾在經(jīng)濟成本上不劃算。買一套過濾裝置要6000多元,,且過濾器*是比較容易損壞的設備,。zui主要是過濾片的成本太高,一片就要幾十元,。按一般液相柱的正常使用壽命計算,,過濾片的成本會遠遠高于色譜柱的成本。
?。?)流動相過濾對于工作效率成本不劃算,。使用溶劑過濾器有一個預清洗、裝備,、使用,、用后清洗,晾干的過程,,至少也有一個小時的時間,。這個成本也不能忽視。
?。?)二手液相色譜儀在實際工作未發(fā)現(xiàn)流動相不過濾會對柱壽命有任何影響,。我們起碼有6年時間沒有做過流動相過濾的工作,但是和國內(nèi)同行相比較,,在同等使用強度下我們的柱壽命是比較長的,。