二手PCR儀采用技術(shù)細(xì)節(jié)分析說(shuō)明
閱讀:678 發(fā)布時(shí)間:2017-11-11
現(xiàn)在的二手PCR儀大都是用半導(dǎo)體制冷片來(lái)控制溫度的,,其通電后一面熱另一面冷,,反向電極則熱冷面反向。半導(dǎo)體制冷片雖然是工業(yè)化生產(chǎn),,都幾乎都是手工的生產(chǎn)的,,因此每一片都有差別,大的生產(chǎn)商會(huì)根據(jù)用戶的需要進(jìn)行配對(duì),,如一臺(tái)二手PCR儀要三片就三片配成大致相同的阻值,。阻值一般是廠家寫(xiě)在每片制冷片上的(自己用萬(wàn)用表是量不準(zhǔn)的,因?yàn)橐煌娖錅囟染妥兓?,阻值就?huì)改變),。
普通的PCR儀:把一次二手PCR儀擴(kuò)增只能運(yùn)行一個(gè)特定退火溫度的PCR儀,叫傳統(tǒng)的PCR儀,,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運(yùn)行,。主要是做簡(jiǎn)單的,,對(duì)目的基因退火溫度的擴(kuò)增。該儀器主要應(yīng)用于科研研究,,教學(xué),,醫(yī)學(xué)臨床,檢驗(yàn)檢疫等機(jī)構(gòu),。
梯度PCR儀:把一次性pcr擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件,,通常12種溫度梯度,這樣的儀器就叫梯度PCR儀,。因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同DNA片段,,其zui適退火溫度不同,通過(guò)設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增,,從而一次性PCR擴(kuò)增,,就可以篩選出表達(dá)量高的zui適退火溫度,進(jìn)行有效的擴(kuò)增,。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增,,這樣節(jié)約成本的同時(shí)也節(jié)約了時(shí)間。主要用于科研,,教學(xué)機(jī)構(gòu),。梯度PCR儀,,在不設(shè)置梯度的情況下也可以做普通二手PCR儀擴(kuò)增。
因此半導(dǎo)體片的質(zhì)量會(huì)影響PCR儀的均勻性,。一般大的生產(chǎn)廠家出廠時(shí)問(wèn)題不大,,但使用一段時(shí)間后,半導(dǎo)體片的性能會(huì)下降,,但下降程度并不一致,,則溫度差別就表現(xiàn)出來(lái)了。
zui大的問(wèn)題是維修,。半導(dǎo)體片本身是不能維修的,。一般二手PCR儀都是多片半導(dǎo)體,普通維修會(huì)只更換其中一片,,這樣就會(huì)造成新的跑得快,,舊的跑得慢,溫度差別就大了,。如果每片半導(dǎo)體片下面都有各自的溫度傳感器,,則可以補(bǔ)償一些,如果是像AB的低端型號(hào)2720,,4片半導(dǎo)體片只有一個(gè)溫度傳感器,,則問(wèn)題大了。當(dāng)然更換半導(dǎo)體片后的裝配也是技術(shù)性很強(qiáng)的活,,不經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的培訓(xùn)是做不到家的,。這也是為什么大廠一般不在現(xiàn)場(chǎng)維修,而是要返廠,,并且是一次性更換一套半導(dǎo)體片,,因此成本較高。