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二手熱循環(huán)儀PCR儀的一些技術要點詳細闡述
閱讀：587 發(fā)布時間：2017-7-14
在二手熱循環(huán)儀PCR儀設計基礎上增加熒光信號激發(fā)和采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng),，形成了具有熒光定量PCR功能的儀器。其PCR擴增原理和普通PCR擴增原理相同，二手熱循環(huán)儀PCR儀時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記，使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增,。擴增的結果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng)，得出量化的實時結果輸出,。
二手熱循環(huán)儀PCR儀有單通道，雙通道和多通道之分,。當只用一種熒光探針標記的時候,，選用單通道；有多種熒光標記的時候使用多通道,。單通道也可以檢測多熒光的標記和目的基因表達產物,，因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量，需多次擴增才能檢測完不同的目的基因片段的量,。多通道利于做多重PCR,，實現一次檢測多種目的基因的功能。
實時熒光定量PCR儀主要應用于臨床醫(yī)學檢測,、生物醫(yī)藥研發(fā),、食品行業(yè)、科研院校等,。
在二手熱循環(huán)儀PCR儀的基礎上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng),，就成了熒光定量PCR儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同,，只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素,、熒光素等進行標記,，使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng)得出量化的實時結果輸出,。把這PCR儀叫做實時二手熱循環(huán)儀PCR儀(qPCR儀),。熒光定量PCR儀有單通道，雙通道,，和多通道,。當只用一種熒光探針標記的時候，選用單通道,，有多熒光標記的時候用多通道,。單通道也可以檢測多熒光的標記的目的基因表達產物，因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量,，需多次擴增才能檢測完不同的目的基因片段的量,。該儀器主要用于醫(yī)學臨床檢測，生物醫(yī)藥研發(fā),，食品行業(yè),，科研院校等機構。
把一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的二手熱循環(huán)儀PCR儀,，叫傳統(tǒng)的PCR儀,，也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運行,。主要是做簡單的,，對目的基因退火溫度的擴增。該儀器主要應用于科研研究,，教學,，醫(yī)學臨床，檢驗檢疫等機構,。
把一次性二手熱循環(huán)儀PCR儀R擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件（溫度梯度）,，通常有12種溫度梯度，這樣的儀器就叫梯度PCR儀,。因為被擴增的不同DNA片段,，其zui適退火溫度是不同的，通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增,，從而一次性二手熱循環(huán)儀PCR儀擴增,，就可以篩選出表達量高的zui適退火溫度，進行有效的擴增,。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,，這樣節(jié)約成本的同時也節(jié)約了時間。主要用于科研，教學機構,。梯度PCR儀,，在不設置梯度的情況下也可以做普通PCR擴增。具有雙槽梯度的不多,，領成具備此功能,。