離心機在細菌學診斷分離培養(yǎng)技術(shù)中的應用
閱讀:3397 發(fā)布時間:2013-2-22
在細菌學診斷工作中,,常需要從被檢材料中分離細菌,并獲得純培養(yǎng)(即單*種細菌的培養(yǎng)物),。因此,,通常要用到離心機對樣品進行離心分離,細菌的離心機分離培養(yǎng)技術(shù)是細菌學診斷中的一項重要基本操作,。
分離細菌的方法很多,,常用的有以下幾種。
將被檢材料接種于適宜培養(yǎng)基,,再于固體培養(yǎng)基表面生長的菌落中,,選樣欲分離菌的單個菌落,移種于另一適宜培養(yǎng)基中培養(yǎng)。因為一個菌落通常由一個細菌生長繁殖所形成,,故培養(yǎng)出的細菌是單一的種類,,即純培養(yǎng)。
用特殊的培養(yǎng)環(huán)境(如厭氧,、二氧化碳環(huán)境等)分離細菌,。
將被檢材料接種子易感動物體內(nèi),使病原菌在動物體內(nèi)繁殖,,然后從動物體內(nèi)取材料利用離心機進行離心分離出需要的成分后培養(yǎng),。利用某些細菌對一些理化因素有特殊抵抗力,用理化方法處理接種材料,,殺死其他微生物而保存需要的細菌,,再分離培養(yǎng)。
一般情況下,,被檢材料用前兩種方法分離培養(yǎng)即可,。如披撿材料污染嚴重,可先用后兩種方法處理,,再用前兩種方法獲得純培養(yǎng),。
在分離培養(yǎng)操作中,嚴格遵守無菌操作,。所有用具,、培養(yǎng)基、試劑都要經(jīng)過滅菌,,而且不能長時間暴露于空氣中,。禁止用手接觸或用口吹已滅菌的器皿內(nèi)部。
根據(jù)被檢材料中可能存在的病原苗的特性,,選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)基和培養(yǎng)條件:(溫度,、氣體環(huán)境等)。進行未知菌的初次分離,,多用幾種培養(yǎng)基,,如肉湯、鮮血瓊脂,、麥康克瓊脂等,,每種培養(yǎng)基接種數(shù)管,,分別放在普通環(huán)境和厭氧環(huán)境中培養(yǎng),。一般經(jīng)過24—78小時觀察結(jié)果,但也有一些病原菌,,需要培養(yǎng)校長時間才能生長,。
被檢材料一般不需要處理,直接按種于培養(yǎng)基上。當懷疑為有芽腦的病原苗時,,可將被檢材料加生理鹽水磨碎,,作成1:10乳劑(液體材料不必稀釋),置60-80℃水浴中20—30分鐘,,以殺死無芽胞的雜菌,,然后再接種于培養(yǎng)基中。
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