一.離心機(jī)的分類: 上對離心機(jī)的分類方法有三種:按用途分,、按轉(zhuǎn)速分和按結(jié)構(gòu)分。 按用途分類:分為制備型離心機(jī)和制備分析離心機(jī),。 制備型離心機(jī):僅供分離濃縮,,提純試樣的離心機(jī)。 制備分析離心機(jī):不但能分離濃縮,、提純試樣,,而且可以通過光學(xué)系統(tǒng)對試樣的沉降過程進(jìn)行觀察,、拍照,、測量、數(shù)字輸出,、打印自動顯示的離心機(jī),。 按轉(zhuǎn)速分類:分為低速離心機(jī)、高速離心機(jī),、超速離心機(jī),。 低速離心機(jī):轉(zhuǎn)速在10000rpm以內(nèi)或相對離心力在15000 ×g 以內(nèi),。 高速離心機(jī):轉(zhuǎn)速在10000∽30000rpm以內(nèi)或相對離心力在15000∽70000 ×g以內(nèi),。 超速離心機(jī):轉(zhuǎn)速在30000rpm以上或相對離心力在70000 ×g以上,。 按結(jié)構(gòu)分類: 一般在高速和低速離心機(jī)根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行分類,,品種繁多,,各廠家命名也無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),??煞譃榕_式離心機(jī),、多管微量臺式離心機(jī)、細(xì)胞涂片離心機(jī),、血液洗滌臺式離心機(jī),、高速冷凍離心機(jī),、大容量低速冷凍離心機(jī)、低速冷凍離心機(jī),、臺式高速冷凍離心機(jī),、臺式低速自動平衡離心機(jī)等。另外國外還有三聯(lián)式(五聯(lián)式)高速冷凍離心機(jī),,專作連續(xù)離心用,。 二.轉(zhuǎn)子的分類應(yīng)用及特點(diǎn) 轉(zhuǎn)子是離心機(jī)用于分離試樣的核心部件,轉(zhuǎn)子規(guī)格,、品種的多少是衡量離心機(jī)生產(chǎn)技術(shù)掌握程度的重要標(biāo)志,,轉(zhuǎn)子一般可分為下列五大類: 固定角轉(zhuǎn)子(Eixed-Angle-Rotor): 主要用于分離沉降速度有明顯差異的顆粒樣品。顆粒在扇形溶地移動的距離很短,,碰到外壁的顆粒沿著管壁滑到管底,,形成沉淀,因此這種轉(zhuǎn)子能很快地收集沉淀物,。分離過程中,,由于管壁的作用,,在離心管內(nèi)將會引起強(qiáng)烈的對流,對具有相同沉降速率的顆粒會產(chǎn)生不良影響,。 甩平轉(zhuǎn)子(Siwing-Bucket-Rotor): 主要用于樣品作密度梯度離心,。顆粒移動距離長,溶液中的組分相對于管壁的位置在離心過程中和離心后不發(fā)生改變,,因此離心效果好,,但因顆粒在離心場中是從旋轉(zhuǎn)中沿徑向散離出去,而不是按相互平行的路線沉降,。顆粒碰到外壁沿著管壁滑到管底,,因此也會產(chǎn)生對流。(但比固定角轉(zhuǎn)子?。┑退贂r啟動或停機(jī)時會產(chǎn)生振動,影響分離效果,,甩平轉(zhuǎn)子有敞開式和封閉式兩種,,一般制備容量大,轉(zhuǎn)速小于10000RPM,,離心力場在16000xg以內(nèi)的,,作成敞開式,主要用于樣品的初分離,。制備容量較前者小,,轉(zhuǎn)速大于10000RPM,離心力場在16000xg以上的,,為了減少風(fēng)力的影響,,一般作成封閉式,主要用于線粒體,、葉綠體,、細(xì)胞核等的分離和密度梯度離心。 連續(xù)離心轉(zhuǎn)子(Continuous-Flow-Rotor): 主要用于懸浮介質(zhì)中高速分離較小的顆粒物質(zhì),,如在培養(yǎng)基中分離細(xì)胞,,在運(yùn)轉(zhuǎn)過程中,懸浮樣品以一定速度從轉(zhuǎn)子體中心流入離心池,,由于溶液中的組分輕重不同,,在離心力場作用下,重粒子具有較大的慣性離心力,、沉降快,,當(dāng)流速增大(降低)到一定值時,重粒子將留在離心池外緣底部,,而介質(zhì)將從出口流出并帶走較輕的粒子,,收集組分的方法是把組分沖洗出離心池或者留在轉(zhuǎn)子體內(nèi),,這種轉(zhuǎn)子是利用離心淘析技術(shù)對整細(xì)胞或大的亞細(xì)胞粒子進(jìn)行分離,在無菌和低溫條件下,,被分離的組分,,能保持活性,回收率高等優(yōu)點(diǎn),。如果液流方向與離心力方向相反,,即降低了粒子運(yùn)行速度,相當(dāng)于增長了運(yùn)行距離,,從而提高了分辨能力,。 區(qū)帶轉(zhuǎn)子(Zonal-Rotor): 主要用于大容量的密度梯度離心,當(dāng)實(shí)驗(yàn)所需制備的樣品量多,,而甩平轉(zhuǎn)子因受到量的限制時,,采用區(qū)帶離心是較好的。主要由帶有四塊葉片的轉(zhuǎn)子體和密封系統(tǒng)組成,,轉(zhuǎn)子體和四塊葉片將離心池分為四個扇形小室,,阻止溶液在離心池中旋轉(zhuǎn),葉片上有徑向?qū)Ч?,溶液通過導(dǎo)管從中心流向轉(zhuǎn)子體外壁,,裝樣和取樣時應(yīng)小心,裝樣一般在2500∽3000rpm運(yùn)轉(zhuǎn)中進(jìn)行,,首先將梯度液中較輕的部分通過密封管道泵入轉(zhuǎn)子內(nèi),,由于慣性力的存在,梯度液在轉(zhuǎn)子外壁的垂直方向形成均勻的一層,,再依次將密度較高的梯度液泵入,,隨著密度的增高和梯度液的不斷泵入,密度較低的梯度液被推向中心,,直到轉(zhuǎn)子*裝滿,,然后通過密封組件中心輸液管把待分離的樣品(其密度與梯度液中zui輕的密度部分還低)加入,接著把密度更低的溶液注入,,用以取代中心附近的樣品,,裝完后,移去密封組件,,蓋上轉(zhuǎn)子蓋,,在一定轉(zhuǎn)速離心一定時間后,轉(zhuǎn)速降至2500∽3000rpm,,裝上密封組件及輸液管,,通過泵入較密的液體到轉(zhuǎn)子的液體由輕至重依次擠出。 區(qū)帶轉(zhuǎn)子避免了用離心管所引起的壁效應(yīng)(Walleffects)和干擾,,提高了分辨率,。 垂直轉(zhuǎn)子(Vertical-Tube-Rotor): 主要用于樣品在短時間作密度梯度離心,。甩平轉(zhuǎn)子分離粒子位移距離長,分辨能力高,,分離后組分的區(qū)帶較寬,,便于回收,但所需時間長,,垂直轉(zhuǎn)子分離的粒子位移距離等于離心管直徑,。轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)動前,管內(nèi)密度梯度溶液的密度是沿重力方向變化,,轉(zhuǎn)動后,,溶液的密度逐漸改變?yōu)殡x心力方向(水平方向)變化,離心結(jié)束后,,溶液的密度變化方向因重力作用又沿鉛垂方向變化,,形成鉛垂方向的密度梯度,由于離心管是垂直放置,,所以溶液粒子位移的距離等于離心管的直徑,。離心時間短,離心后樣品組分的區(qū)帶較寬,,但因離心時間短,粒子得不到充分分離,,將會失去一些組分,,又因區(qū)帶與梯度介質(zhì)的接觸面大,易于擴(kuò)散,,停機(jī)后密度重新定向,,易于混合,所以作區(qū)帶離心的效果,,垂直轉(zhuǎn)子不于甩平轉(zhuǎn)子,。 離心機(jī)轉(zhuǎn)子的轉(zhuǎn)速跟轉(zhuǎn)子的材料和強(qiáng)度有關(guān),一般采用強(qiáng)度好,、重量輕的超硬鋁合金(LC4),,超速離心機(jī)采用鈦合金(TiC4)。一般來說,,對同一離心機(jī)重量輕,、容量小的轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速要高,反之轉(zhuǎn)速要低,。轉(zhuǎn)子的保養(yǎng)及壽命管理在以后的章節(jié)中介紹,。 公司名稱:湘儀離心機(jī)儀器有限公司 : :盧 公司:www.xiangyilxj.com或者www.lxjxy.com E-mail:[email protected] |
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