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液相色譜柱的分類(lèi)

閱讀:1145發(fā)布時(shí)間:2016-1-29

液相色譜柱的分類(lèi):(按色譜固定相基質(zhì)分)

一.硅膠基質(zhì):

1.反相色譜柱:

反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ),表面鍵合有極性相對(duì)較弱的官能團(tuán)的鍵合相,。

反相色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng),,通常為水,緩沖液與甲醇,,已腈等混合物,。

樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)組合zui先被沖出,而極性弱的組份會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留,。

常用的反相填料有C18(ODS),、C8(MOS)、C4(B),、C6H5(Phenyl)等,。

2.正相色譜:

正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團(tuán),,如胺基團(tuán)(NH2,APS)和氰基團(tuán)(CN,,CPS)的鍵合相填料。

由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團(tuán)的極性較強(qiáng),,因此,,分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小,即極性強(qiáng)弱的組份zui先被沖洗出色譜柱,。

正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene  Chloride)等,。

3.離子交換色譜柱:以磺化交聯(lián)強(qiáng)陰/陽(yáng)離子鍵合硅膠色譜柱,,常用規(guī)格:強(qiáng)陰離子色譜柱(SAX),強(qiáng)陽(yáng)離子交換色譜柱(SCX)
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二 .聚合物基質(zhì):

聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,,其主要優(yōu)點(diǎn)是在PH值為1~14均可使用,。相對(duì)與硅膠基質(zhì)的C18填料,這類(lèi)填料具有更強(qiáng)的疏水性,;大孔的聚合物填料對(duì)蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效?,F(xiàn)在的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對(duì)硅膠基質(zhì)填料,色譜柱柱效較低,。

三.其他無(wú)機(jī)填料:

其它HPLC的無(wú)機(jī)填料色譜柱也已經(jīng)商品化,。由于其特殊的性質(zhì),,一般于特殊的用途。如石墨化碳也用于正逐漸成為反相色譜填料,。這種填料的分離不同與硅膠基質(zhì)烷基鍵合相,,石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ),不再需其它的表面改性,,該柱填料一般比烷基鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強(qiáng),,石墨化碳可用于分離某些幾何導(dǎo)構(gòu)體,又由于HPLC流動(dòng)相中不會(huì)被溶解,,這類(lèi)柱可在任何PH與溫度下使用,。氧化鋁也可用于HPLC,

氧化鋁微粒剛性強(qiáng),,可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床,,其優(yōu)點(diǎn)是可在PH高達(dá)12的流動(dòng)相中使用。

但由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強(qiáng),,應(yīng)用范圍受到一定的限制,,所以未能廣泛應(yīng)用,新型氧化鋯填料也可用于HPLC,,商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱,,應(yīng)用PH范圍1~14,溫度可達(dá)100℃,。由于氧化鋯填料幾年才開(kāi)始研究,,加之面臨的實(shí)驗(yàn)難度,其重要用途與優(yōu)勢(shì)尚在進(jìn)行中,。

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