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色譜柱孔徑選擇小知識(shí)

閱讀:5526發(fā)布時(shí)間:2015-12-22


1.測(cè)量法和表示

  孔徑分布和比表面積可以通過相同的方法來測(cè)量,如:氮吸附法和汞空隙率測(cè)定計(jì)平均孔徑也能通過逆向分子排阻法來測(cè)量,,但真正的孔徑分布不能用個(gè)方法來測(cè)量,。不過,因其它方法存在一些問題,,高聚物填料仍然要采用逆向分子排阻法,。孔徑用nm或埃做單位,??讖椒植嫉闹凳菢?biāo)稱的,而且不同生產(chǎn)商有不同的方法,。所以,,某生產(chǎn)商標(biāo)稱10nm的可能與另一生產(chǎn)商標(biāo)稱8nm或12nm的相同。

 

2.孔徑與保留

  孔徑是填料物理性質(zhì)的一個(gè)基本因子,并決定顆粒相比率(phase ratio),。進(jìn)一步?jīng)Q定了填料的保留性質(zhì)和載樣量,。

 

3.孔徑和分子量

  被分析物分子小隨分子量增加而增大。如果其分子量大小約為孔徑的三分之一或大,,則傳質(zhì)會(huì)嚴(yán)重受阻并造成低效能和峰展寬,。這樣的情況下,要用更大孔徑的填料,。對(duì)所有標(biāo)準(zhǔn)分析問題,,通常用孔徑在大概6nm到13nm之間的填料。更大孔徑的填料也可以用在肽類分離上,。分子量比肽更大的,,如蛋白質(zhì),用30nm孔徑的填料更加合適,。但這樣的填料與小分子作用的不好,,因?yàn)楸缺砻娣e減少了。對(duì)被分析物分子量小于3000的,,應(yīng)用孔徑小些的,。被分析物分子量大于10000的,應(yīng)用孔徑30nm的填料,。分子量介于3000到10000的,,大的小的都可以得到滿意結(jié)果。

 

4.孔徑分布

  大HPLC填料的孔徑分布跨度有一個(gè)數(shù)量級(jí),。這樣的分布對(duì)大多數(shù)實(shí)用目的已經(jīng)足夠的窄了,。然而,微孔的減少時(shí)填料的性能提高了,。這可能是有窄孔徑分布的填料如Waters Spherisorb的一個(gè)優(yōu)勢(shì),。

 

5.非孔填料

  非孔填料能用于高分子量的、在大孔徑填料中表現(xiàn)出擴(kuò)散受限制的被分析物,。但是,,只能得到有限的比表面積。

 

6.選擇正確的孔徑

  被分析物的分子量            推薦使用的填料孔徑

  <3000                          6到13nm

  3000到10000                    10nm

  >10000(例如蛋白質(zhì))          30到100nm

 


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