選擇ultra液相色譜柱,，認(rèn)準(zhǔn)以下幾點(diǎn)

閱讀：610發(fā)布時(shí)間：2020-8-26

ultra液相色譜柱通常分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱,，或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團(tuán)的鍵合相硅膠柱,；反相柱填料主要以硅膠為基質(zhì)，正確地選擇它,，可以給我們帶來(lái)很大的便利,。

選擇的方法和條件：

①填料基質(zhì)

a.硅膠基質(zhì)：純度高本錢低，強(qiáng)度大,，化學(xué)修飾輕易,，但pH值范圍有限。大多硅膠基質(zhì)填料在pH2-8之間穩(wěn)定,，但經(jīng)過(guò)特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩(wěn)定在pH1.5-10,。

b.聚合物基質(zhì)：應(yīng)用pH值范圍寬，溫度穩(wěn)定(高溫可以達(dá)到80度以上),，機(jī)械強(qiáng)度小,。

②顆粒外形

大多現(xiàn)代HPLC填料都是球形顆粒，但有時(shí)是不規(guī)則的顆粒,。球形顆粒提供較低的柱壓,、較高的柱效和穩(wěn)定性以及較長(zhǎng)的ultra液相色譜柱壽命在使用高粘度的活動(dòng)相時(shí);不規(guī)則顆粒有較大比表面積和相對(duì)低廉的價(jià)格。

③顆粒粒徑

粒徑越小柱效越高,、分離度越高,，但同時(shí)會(huì)導(dǎo)致較高柱壓降。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復(fù)雜樣品,UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱,。

④含碳量

含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例,，與比表面積和鍵合覆蓋度等有關(guān)。高含碳量進(jìn)步柱容量,、分辨率及分析時(shí)間,，用于要求高分離度的復(fù)雜樣品;低含碳量分析時(shí)間短、展現(xiàn)不同的選擇性,，用于快速分析簡(jiǎn)單樣品及需要高含水活動(dòng)相條件的樣品,。一般C18的含碳量在7-19%不等。

⑤孔徑和比表面積

HPLC吸附介質(zhì)是多孔的顆粒,，盡大多數(shù)的反應(yīng)表面于孔內(nèi),。因此，分子必須進(jìn)進(jìn)孔內(nèi)才能被吸附和分離,。

孔徑和比表面積是相輔相成的兩個(gè)概念,?？讖叫”缺砻娣e大，反之亦然,。比表面積大,，增加樣品與鍵合相之間的反應(yīng)，增加保存,上樣量和復(fù)雜成分的分離度;比表面積小,，平衡時(shí)間快,，適合梯度分析。

⑥孔容和機(jī)械強(qiáng)度

ultra液相色譜柱孔容,，又稱“孔體積”,。指單位顆粒的空隙體積大小。它能很好的反應(yīng)填料的機(jī)械強(qiáng)度,?？左w積大的填料相對(duì)孔體積小的填料機(jī)械強(qiáng)度要略弱?？左w積為1.5mL/g或更小的填料大多用于HPLC分離,，而孔體積大于1.5mL/g的填料使用于尺寸排阻色譜和低壓色譜。

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